Количественное определение 8-метоксипсоралена в мягкой лекарственной форме методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

   Цель. Разработка и валидация методики количественного определения 8-метоксипсоралена в мягкой лекарственной форме в соответствии с требованиями Государственной Фармакопеи Российской Федерации XV издания и Фармакопеи Евразийского экономического союза.

   Методы. Количественное определение 8-метоксипсоралена проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии на приборе «Chromaster 5000» (Hitachi, Япония) с диодно-матричным детектором. Хроматографирование выполняли на колонке Kromasil EternityXT-5-C18, 5 мкм, 250 × 4.6 мм в изократическом режиме с подвижной фазой ацетонитрил/вода в соотношении 50 : 50 % (об/об). Скорость потока составляла 1.0 мл/мин, длина волны детектирования — 250 нм.

   Результаты. Установлено, что экстракция активного вещества из геля под действием ультразвука при температуре 40 °C в течение 15 мин с использованием ацетонитрила является наиболее оптимальным условием для извлечения 8-метоксипсоралена. Наилучшее пиковое разрешение 8-метоксипсоралена было достигнуто при анализе геля на длине волны 250 нм с помощью обращенно-фазового сорбента с октадецильной фазой (С₁₈), привитой к силикагелю. Использование в качестве подвижной фазы смеси ацетонитрил/вода в объемном соотношении 50 : 50 % позволило обеспечить минимальное время хроматографирования при сохранении оптимального разрешения. По данным валидационных процедур уставлено, что методика специфична, линейна (R² > 0.997) и воспроизводима (относительное стандартное отклонение составило ≤ 3.0 %). Точность аналитической методики составила от 98.26 % до 101.02 %, а значения пределов обнаружения и количественного определения — 0.006 и 0.020 мкг/мл соответственно. Разработанная методика количественного определения показала свою устойчивость при варьировании как температуры колонки, так и скорости потока на ±5 %.

   Выводы. Методика количественного определения 8-метоксипсоралена была эффективно реализована с использованием метода высокоэффективной жидкостной хроматографии и обладает рядом преимуществ по сравнению с ранее описанными методиками. Эти преимущества заключаются в сокращении времени анализа, увеличении чувствительности и эффективности, что позволяет применять разработанную методику для оценки количественного содержания 8-метоксипсоралена в мягкой лекарственной форме — геле при лечении псориаза.

1. Bishnoi A., Parsad D. Phototherapy for vitiligo : A narrative review on the clinical and molecular aspects, and recent literature. Photoderm. Photoimm. Photomed. 2024;40(3):12968. doi: 10.1111/phpp.12968

2. Molla A. A Comprehensive Review of Phototherapy in Atopic Dermatitis: Mechanisms, Modalities, and Clinical Efficacy. Cureus. 2024;16(3):e56890. doi: 10.7759/cureus.56890

3. Barros N., Sbroglio L., Buffara M., Baka J., Pessoa A., Azulay-Abulafia L. Phototherapy. An. Bras. Dermatol. 2021;96(4):397–407. doi: 10.1016/j.abd.2021.03.001

4. Wełniak A., Białczyk A., Kamińska B., Czajkowski R. Phototherapy in the management of vitiligo – an updated narrative review. Eur. J. Clin. Exp. Med. 2024;22(3):668–676. doi: 10.15584/ejcem.2024.3.26

5. Zengarini C., Baruffaldi G., Piraccini B.M., Bardazzi F., Mussi M., Stancic B., Pileri A. Nb-UVB and PUVA therapy in treating early stages of Mycosis Fungoides: A single-center cross-sectional study. Photoderm. Photoimm. Photomed. 2023;39(5):435–440. doi: 10.1111/phpp.12873

6. Serrano-Pérez J.J., González-Luque R., Merchán M., et al. The family of furocoumarins: Looking for the best photosensitizer for phototherapy. J. Photochem. Photobiol. A: Chem. 2008;199(1):34–41. doi: 10.1016/j.jphotochem.2008.04.013

7. Diekmann J., Theves I., Thom K.A., Gilch P. Tracing the Photoaddition of Pharmaceutical Psoralens to DNA. Molecules. 2020;25(22):5242. doi: 10.3390/molecules25225242

8. Vieyra-Garcia P., Wolf P. A deep dive into UV-based phototherapy: Mechanisms of action and emerging molecular targets in inflammation and cancer. Pharmacol. Ther. 2021;222:107784. doi: 10.1016/j.pharmthera.2020.107784

9. Schalla W., Schaefer H., Kammerau B., Zesch A. Pharmacokinetics of 8-methoxypsoralen (8-MOP) after oral and local application. J. Invest. Dermatol. 1976;66:258–259.

10. Lapolla W., Yentzer B.A., Bagel J., Halvorson C.R., Feldman S.R. A review of phototherapy protocols for psoriasis treatment. J. Am. Acad. Dermatol. 2011;64(5):936–949. doi: 10.1016/j.jaad.2009.12.054

11. Hönigsmann H., Szeimies R., Knobler R. Chapter 238. Photochemotherapy and Photodynamic Therapy. In: Goldsmith L.A., Katz S.I., Gilchrest B.A., Paller A.S., Leffell D.J., Wolff K. (Eds.). Fitzpatrick’s Dermatology in General Medicine. 8^th Edition. TMcGraw-Hill Companies; 2012.

12. Kassem A.A., Abd El-Alim S.H., Asfour M.H. Enhancement of 8-methoxypsoralen topical delivery via nanosized niosomal vesicles: formulation development, in vitro and in vivo evaluation of skin deposition. Int. J. Pharm. 2017;517(1–2): 256–268. doi: 10.1016/j.ijpharm.2016.12.018

13. Barradas T.N., Senna J.P., Cardoso S.A., de Holanda e Silva K.G., Mansur C.R.E. Formulation characterization and in vitro drug release of hydrogel-thickened nanoemulsions for topical delivery of 8-methoxypsoralen. Mater. Sci. Eng. C Mater. Biol. Appl. 2018;92:245–253. doi: 10.1016/j.msec.2018.06.049

14. Wu J.Y., Li Y.J., Liu T.T., et al. Microemulsions vs chitosan derivative-coated microemulsions for dermal delivery of 8-methoxypsoralen. Int. J. Nanomed. 2019;14:2327–2340. doi: 10.2147/IJN.S191940

15. Pitzanti G., Rosa A., Nieddu M., et al. Transcutol® P containing SLNs for improving 8-methoxypsoralen skin delivery. Pharmaceutics. 2020;12(10):973. doi: 10.3390/pharmaceutics12100973

16. Chew Y.L., Khor M.A., Lim Y.Y. Choices of Chromatographic Methods as Stability Indicating Assays for Pharmaceutical Products : A Review. Heliyon. 2021;7(3):e06553. doi: 10.1016/j.heliyon.2021.e06553

17. Araujo P. Key Aspects of Analytical Method Validation and Linearity Evaluation. J. Chromatogr. B. Anal. Technol. Biomed. Life Sci. 2009;877(23):2224–2234. doi: 10.1016/j.jchromb.2008.09.030

18. Mahmoud D., ElMeshad A., Fadel M., Tawfik A., Ramez S. Photodynamic therapy fortified with topical oleyl alcohol-based transethosomal 8-methoxypsoralen for ameliorating vitiligo: Optimization and clinical study. Int. J. Pharm. 2022;614:121459. doi: 10.1016/j.ijpharm.2022.121459

19. Агеев В.П., Шляпкина В.И., Куликов О.А., Заборовский А.В., Тарарина Л.А. Качественный и количественный анализ основных производных псоралена сока борщевика Сосновского. Фармация. 2022;71(3):10–17. doi: 10.29296/25419218-2022-03-02

20. Kulikov O., Ageev V., Brodovskaya E., Shlyapkina V., Petrov P., Zharkov M., Yakobson D., Maev I., Sukhorukov G., Pyataev N. Evaluation of photocytotoxicity liposomal form of furanocoumarins Sosnowsky’s hogweed. Chem. Biol. Interact. 2022;357:109880. doi: 10.1016/j.cbi.2022.109880

21. Ahmed A., Skinley K., Zhang H. Column technology for liquid chromatography. In: Fanali S., Haddad P.R., Poole C., Lloyd D.K. (Eds.). Liquid Chromatography: Fundamentals and Instrumentation. Volume 1 in Handbooks in Separation Science. 2023. P. 37–60. doi: 10.1016/B978-0-323-99968-7.00007-2

22. Bachhav H., Shirsath G., Badhe S., Kurne D., Sonawane S. AI-driven data analysis for identification of impurities in HPLC chromatograms & artificial intelligent system for HPLC column selection and method development. World J. Pharmac. Res. 2024;13(13)238–263.

23. García-Alvarez-Coque M., Torres-Lapasió J., Ruiz-Angel M., Navarro-Huerta J. Secondary chemical equilibria in reversed-phase liquid chromatography. In: Fanali S., Haddad P.R., Poole C., Lloyd D.K. (Eds.). Liquid Chromatography: Fundamentals and Instrumentation. Volume 1 in Handbooks in Separation Science. 2023. P. 121–143. doi: 10.1016/B978-0-323-99968-7.00012-6

24. Žuvela P., Skoczylas M., Jay Liu J., Ba̧czek T., Kaliszan R., Wong M.W., Buszewski B. Column Characterization and Selection Systems in Reversed-Phase High-Performance Liquid Chromatography. Chem. Rev. 2019;119(6):3674–3729. doi: 10.1021/acs.chemrev.8b00246