ОБНАРУЖЕНИЕ ГИДРОПЕРОКСИДОВ В РАСТВОРАХ ФОТООКИСЛЕННОГО ПСОРАЛЕНА

Растворы фотоокисленного псоралена обладают целым рядом биологических эффектов, механизм реализации которых предполагает участие в них гидропероксидов. В настоящей работе содержание гидропероксидов в растворах фотоокисленного псоралена оценивали фотометрически методом FOX-анализа (от англ. Ferrous Oxidation + Xylenol Orange). В экспериментах использовали модифицированный FOX-реагент, с 10-кратным содержанием ксиленолового оранжевого, позволяющий количественно обнаруживать в водной фазе до 50 мкМ гидропероксидов. В процессе фотоокисления 0.1 мМ раствора псоралена в фосфатном буферном растворе продукция гидропероксидов растет с увеличением дозы УФ-А-облучения (~2.5 мкМ экв. H₂O₂ для дозы 252 кДж/м² и ~11 мкМ экв. H₂O₂ для дозы 1512 кДж/м²) и достигает ~16.5 мкМ экв. H₂O₂ в случае максимальной исследованной дозы облучения (3024 кДж/м²). Сравнение кинетики фотолиза псоралена и формирования гидропероксидов позволяет сделать вывод, что генерация гидропероксидов является результатом вторичных фотохимических процессов с участием фотопродуктов псоралена, предположительно, фотоиндуцированного автоокисления фотопродуктов псоралена альдегидной природы.

псорален, фотоокисление, гидропероксиды, пероксид водорода, ксиленоловый оранжевый, спектрофотометрия

1. Racz E., Prens E.P. Phototherapy and photochemotherapy for psoriasis. Dermatol. Clin. 2015; 33: 79-89.

2. Trautinger F., Just U., Knobler R. Photopheresis (extracorporeal photochemotherapy). Photochem. Photobiol. Sci. 2013; 12: 22-28.

3. Caffieri S. Furocoumarin photolysis: Chemical and biological aspects. Photochem. Photobiol. Sci. 2002: 1: 149-157.

4. Potapenko A.Ya., Kyagova A.A., Bezdetnaya L.N., Lysenko E.P., Chernyakhovskaya I.Yu., Bekhalo V.A., Nagurskaya E.V., Nesterenko V.A., Korotky N.G., Akhtyamov S.N., Lanshchikova T.M. Products of psoralen photooxidation possess immunomodulative and antileukemic effects. Photochem. Photobiol. 1994; 60: 171-174.

5. Kyagova A.A., Malakhov M.V., Potapenko A.Ya. Immunosuppression caused by photochemo and photodynamic therapy: Focus on photosensitizer photoproducts. In: Taylor C.B., ed. Immunosuppression: New research. Nova Science Publishers, 2009: 167-183.

6. Nevezhin E.V., Vlasova N.V., Pyatnitskiy I.A., Lysenko E.P., Malakhov M.V. On the mechanism of erythrocyte hemolysis induced by photooxidized psoralen. Biochemistry (Moscow). 2015; 80(6): 763-768.

7. Potapenko A.Y., Saparov S.M., Agamalieva M.A., Lysenko E.P., Bezdetnaya L.N., Sukhorukov V.L. Fe2+ ions and reduced glutathione - chemical activators of psoralen-sensitized photohaemolysis. J. Photochem. Photobiol. B. 1993; 17: 69-75.

8. Lysenko E.P., Melnikova V.O., Andina E.S., Wunderlich S., Pliquett F., Potapenko A.Y. Effects of glutathione peroxidase and catalase on hemolysis and methemoglobin modifications induced by photooxidized psoralen. J. Photochem. Photobiol. B. 2000; 56: 187-195.

9. Potapenko A.Ya., Kyagova A.A., Andina E.S., Zhuravel N.N., Lysenko E.P., Moller M., Stopper H., Adam W., Saha-Moller C.R. Photohemolysis sensitized by the furocoumarin imperatorin and its oxyfunctionalized derivatives. Photochem. Photobiol. 1999; 69: 410-420.

10. Kyagova A., Potapenko A., Moller M., Stopper H., Adam W. Photohemolysis sensitized by the furocoumarin derivative alloimperatorin and its hydroperoxide photooxidation product. Photochem. Photobiol. 2014; 90: 162-170.

11. Rodenko I.N., Osipov A.N., Lysenko E.P., Potapenko A.Y. Degradation of psoralen photooxidation products induced by ferrous ions. J. Photochem. Photobiol. B. 1993; 19: 39-48.

12. Potapenko A.Ya., Malakhov M.V., Kyagova A.A. Photobiophysics of furocoumarins. Biophysics.2004; 49(2): 307-324.

13. Marley K.A., Larson R.A. A new photoproduct from furocoumarin photolysis in dilute aqueous solution: 5-formyl-6-hydroxybenzofuran. Photochem. Photobiol. 1994; 59: 503-505.

14. Marley K.A., Larson R.A., Davenport R. Alternative mechanisms of psoralen phototoxicity. ACS Symposium Series. 1995; 616 (Ch. 15): 179-188

15. Aboul-Enein H.Y., Kladna A., Kruk I., Lichszteld K., Michalska T. Effect of psoralens on Fenton-like reaction generating reactive oxygen species. Biopolymers. 2003; 72(1): 59-68.

16. Gupta B.L. Microdetermination techniques for H2O2 in irradiated solutions. Microchem. J. 1973; 18: 363-374.

17. Jiang Z.Y., Woollard A.C., Wolff S.P. Hydrogen peroxide production during experimental protein glycation. FEBS Lett. 1990; 268: 69-71.

18. Wolff S. Ferrous Ion oxidation in presence of ferric ion indicator Хylenol Оrange for measurement of hydroperoxides. Methods in Enzymology. 1994; 233: 182-189.

19. Gay C., Collins J., Gebicki J. Determination of iron in solutions with the ferric-Хylenol Оrange complex. Anal. Biochem. 1999; 273: 143-148.

20. Gay C., Collins J., Gebicki J. Hydroperoxide assay with the ferric-Хylenol Оrange complex. Anal. Biochem. 1999; 273: 149-155.

21. Bou R., Codony R., Tres A., Decker E., Guardiola F. Determination of hydroperoxides in foods and biological samples by the ferrous oxidationХylenol Оrange method: A review of the factors that influence the method's performance. Anal. Biochem. 2008; 377: 1-15.

22. Winterbourne C.C., Parsons-Mair H.N., Gebicki S.M., Gebicki J.M., Davies M.J. Requirements for superoxide-dependent tyrosine hydroperoxide formation in peptides. Biochem. J. 2004; 381: 241-248.

23. Mizuguchi H., Takao Y. Visual threshold detection of trace metal ions using a bi-functional metallochromic reagent. Analitycal Sci. 2001; 17 (Suppl.): 1687-1689.