Determining 8-oxo-2’-deoxyguanosine/2’-deoxyguanosine ratio in DNA by reverse phase HPLC combined with amperometric detection
Abstract
The article presents an optimized method for the determination of the ratio of 8-oxo-2'-deoxyguanosine (formed in DNA due to the action of active forms of oxygen) to 2'-deoxyguanosine. The ratio was determined by reverse phase HPLC combined with amperometric detection. It was shown that the ratio increases upon oxidative stress caused by the action of large doses of ascorbic acid in samples of DNA isolated from the liver of experimental rats.
Keywords
8-oxo-2'-deoxyguanosine,
oxidative stress,
ascorbic acid,
reverse phase HPLC,
amperometric detection
577.088.1
About the Authors
D. S. Esipov
МГУ им. М.В. Ломоносова
Russian Federation
Russian Federation
E. V. Sidorenko
МГУ им. М.В. Ломоносова
Russian Federation
Russian Federation
O. V. Esipova
M.V. Lomonosov Moscow State University of Fine Chemical Technologies, 86, Vernadskogo pr., Moscow 119571
Russian Federation
Russian Federation
T. A. Gorbacheva
M.V. Lomonosov Moscow State University of Fine Chemical Technologies, 86, Vernadskogo pr., Moscow 119571
Russian Federation
Russian Federation
T. S. Nevredimova
M.V. Lomonosov Moscow State University of Fine Chemical Technologies, 86, Vernadskogo pr., Moscow 119571
Russian Federation
Russian Federation
A. L. Krushinskiy
МГУ им. М.В. Ломоносова
Russian Federation
Russian Federation
V. S. Kuzenkov
МГУ им. М.В. Ломоносова
Russian Federation
Russian Federation
V. P. Reutov
Институт высшей нервной деятельности и нейрофизиологии РАН
Russian Federation
Russian Federation
References
1. Cooke, M. S. Oxidative DNA damage: mechanisms, mutation, and disease / M. S. Cooke, M. D. Evans // FASEB J. - 2003. - Vol. 17. - P. 1195-1214.
2. Hwang, E. DNA damage, a biomarker of carcinogenesis: its measurement and modulation by diet and environment / E. Hwang, P. E. Bowen // Food Science & Nutrition. - 2007. - Vol. 47. - P. 27-50.
3. Haghdoost, S. Biomarker of oxidative stress and their application for assessment of individual radio sensitivity / S. Haghdoost. - Stockholm : Stockholm University, 2005. - 43 p.
4. Яшин, А. Я. Аналитические возможности жидкостного хроматографа «ЦветЯуза» с электрохимическими детекторами / А. Я. Яшин, Я. И. Яшин // Рос. хим. журн. (Журн. Рос. хим. об-ва им. Д.И. Менделеева). - 2002. - Т. XLVI, № 4. - С. 109-115.
5. Савин, П. В. Исследование антиоксидантных свойств желейного мармелада / П. Н. Саввин, В. М. Болотов // Химия раст. сырья. - 2008.- № 4. - С. 177-179.
6. Комплексная оценка состояния системы про-/антиоксиданты в различных биологических средах у хирургических больных с гнойно-септическими осложнениями / И. И. Павлюченко [и др.] // Успехи соврем. естествознания. - 2006. - № 6. - С. 82-83.
7. Сравнительная антиоксидантная емкость некоторых отечественных и импортных чайных напитков / И. М. Быков [и др.] // Успехи соврем. естествознания. - 2005. - № 10.- С. 40-41.
8. Cheng, K. C. 8-Hydroxyguanine, an abundant form of oxidative DNA damage, cause G→T and A→C substitutions / K. C. Cheng, D. S. Cahill // J. Biol. Chem. - 1992. - Vol. 267, № 1. - P. 166-172.
9. Takagi, A. Inhibitory effects of vitamin E and acid on 8-hydroxydeoxyguanosine formation in liver nuclear DNA of rats treated with 2-nitropropane / A. Takagi, K. Sai, T. Umemura // Cancer Lett. - 1995. - Vol. 91. - P. 139-144.
10. Huang, X. Importance of complete DNA digestion in minimizing variability of 8-oxo-dG analyses / X. Huang, J. Powell // Free Radical Biology & Medicine. - 2001. - Vol. 31. - P. 1341-1351.
11. Phenolic extraction of DNA from mammalian tissues and conversion to deoxyribo-nucleoside-5'-monophosphates devoid of ribonucleotides / O. Shimelis [et al.] // J. Chromatography. - 2004. - Vol. 1053. - P. 143-149.
12. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты / Е. Б. Меньщикова, В. З. Ланкин, Н. К. Зенков, И. А. Бондарь. - М. : Слово, 2006. - 556 c.
Review
For citations:
Esipov D.S., Sidorenko E.V., Esipova O.V., Gorbacheva T.A., Nevredimova T.S., Krushinskiy A.L., Kuzenkov V.S., Reutov V.P. Determining 8-oxo-2’-deoxyguanosine/2’-deoxyguanosine ratio in DNA by reverse phase HPLC combined with amperometric detection. Fine Chemical Technologies. 2010;5(3):69-74. (In Russ.)
Views: 231
Email this article 
