chemicallytechFine Chemical TechnologiesТонкие химические технологии2410-65932686-7575MIREA – Russian Technological University (RTU MIREA).10.32362/2410-6593-2026-21-2-188-211LAJHYGchemicallytech-2387Research ArticleBIOCHEMISTRY AND BIOTECHNOLOGYБИОХИМИЯ И БИОТЕХНОЛОГИЯDevelopment and scaling of a chromatographic purification technology for single-domain antibodies fused to the Fc fragment of human IgG1Разработка и масштабирование технологии хроматографической очистки однодоменных антител, слитых с Fc-фрагментом IgG1 человекаhttps://orcid.org/0000-0003-0792-7063ПолянскийД. С.PolyanskyD. S.

Полянский Дмитрий Сергеевич, ассистент, кафедра аналитической химии им. И.П. Алимарина, Институт тонких химических технологий им. М.В. Ломоносова

Scopus Author ID 57890564200

119454, Москва, пр-т Вернадского, д. 78

Dmitry S. Polyansky, Assistant Professor, I.P. Alimarin Department of Analytical Chemistry, M.V. Lomonosov Institute of Fine Chemical Technologies

Scopus Author ID 57890564200

78, Vernadskogo pr., Moscow, 119454

polanskiydmitriy15@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-4130-177XПрокофьевВ. В.ProkofievV. V.

Прокофьев Владимир Владимирович, лаборант-исследователь, лаборатория иммунобиотехнологии

Scopus Author ID 57300704700

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Vladimir V. Prokofiev, Laboratory Research Assistant, Laboratory of Immunobiotechnology

Scopus Author ID 57300704700

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

vladimir.prokofev.96@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-8060-4370СаморуковаА. В.SamorukovaA. V.

Саморукова Александра Владимировна, ведущий технолог, филиал «Медгамал»

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Alexandra V. Samorukova, Leading Technologist, Medgamal branch

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

av.samorukova@medgamal.ruhttps://orcid.org/0009-0009-7886-6019ШишконаковФ. А.ShishkonakovF. A.

Шишконаков Федор Алексеевич, технолог, филиал «Медгамал»

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Fedor A. Shishkonakov, Technologist, Medgamal branch

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

fa.shishkonakov@medgamal.ruhttps://orcid.org/0009-0002-9296-0588ВасильевД. В.VasilievD. V.

Васильев Дмитрий Валерьевич, технолог, филиал «Медгамал»

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Dmitry V. Vasiliev, Technologist, Medgamal branch

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

vasilyevdv@medgamal.ruhttps://orcid.org/0000-0002-2687-5185РябоваЕ. И.RyabovaE. I.

Рябова Екатерина Игоревна, младший научный сотрудник, лаборатория иммунобиотехнологии

Scopus Author ID 57301278100, ResearcherID AAE-7335-2022

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Ekaterina I. Ryabova, Junior Researcher, Laboratory of Immunobiotechnology

Scopus Author ID 57301278100, ResearcherID AAE-7335-2022

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

ryabovaei96@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0003-3776-3856ДеркаевА. А.DerkaevA. A.

Деркаев Артем Алексеевич, младший научный сотрудник, лаборатория иммунобиотехнологии

Scopus Author ID 57381507000, ResearcherID AFU-7075-2022

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Artem A. Derkaev, Junior Researcher, Laboratory of Immunobiotechnology

Scopus Author ID 57381507000, ResearcherID AFU-7075-2022

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

derkaev.a@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0001-8594-2627ГосударевА. И.GosudarevA. I.

Государев Андрей Игоревич, начальник отделения разработки и масштабирования, филиал «Медгамал»

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Andrey I. Gosudarev, Head of the Department of Development and Scaling, Medgamal branch

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

gosudarev@medgamal.ruhttps://orcid.org/0000-0002-3582-0012ЕфимоваЮ. А.EfimovaYu. А.

Ефимова Юлия Александровна, к.х.н., доцент, кафедра аналитической химии им. И.П. Алимарина, Институт тонких химических технологий им. М.В. Ломоносова

Scopus Author ID 25228417800

119454, Москва, пр-т Вернадского, д. 78

Yuliya A. Efimova, Cand. Sci. (Chem.), Assistant Professor, I.P. Alimarin Department of Analitical Chemistry, M.V. Lomonosov Institute of Fine Chemical Technologies

Scopus Author ID 25228417800

78, Vernadskogo pr., Moscow, 119454

efimova_yulia@bk.ruhttps://orcid.org/0000-0002-1289-3411ЩебляковД. В.ShcheblyakovD. V.

Щебляков Дмитрий Викторович, д.б.н., ведущий научный сотрудник, заведущий лабораторией иммунобиотехнологии

Scopus Author ID 35073056900, ResearcherID E-5899-2014

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Dmitry V. Shcheblyakov, Dr. Sci. (Biol.), Leading Researcher, Head of the Laboratory of Immunobiotechnology

Scopus Author ID 35073056900, ResearcherID E-5899-2014

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

sdmitryv@yahoo.comКарповА. П.KarpovA. P.

Карпов Андрей Павлович, к.б.н., главный технолог, филиал «Медгамал»

Scopus Author ID 22834845200

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Andrey P. Karpov, Cand. Sci. (Biol.), Chief Technologist, Medgamal branch

Scopus Author ID 22834845200

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

ap.karpov@medgamal.ruhttps://orcid.org/0000-0002-2063-2449ЕсмагамбетовИ. Б.EsmagambetovI. B.

Есмагамбетов Ильяс Булатович, к.б.н., ведущий научный сотрудник, заведующий лабораторией стромальной регуляции иммунитета

Scopus Author ID 56120429700, ResearcherID E-3327-2014

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Ilias B. Esmagambetov, Cand. Sci. (Biol.), Leading Researcher, Head of the Laboratory of Stromal Regulation of Immunity

Scopus Author ID 56120429700, ResearcherID E-3327-2014

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

iesmagambetov@yandex.ruМИРЭА — Российский технологический университет (Институт тонких химических технологий им. М.В. Ломоносова)РоссияMIREA – Russian Technological UniversityRussian FederationНациональный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи Министерства Здравоохранения Российской ФедерацииРоссияN.F. Gamaleya National Research Center for Epidemiology and Microbiology (The Gamaleya National Center), Ministry of Health of the Russian FederatiRussian Federation202606052026212188211Copyright © Polyansky D.S., Prokofiev V.V., Samorukova A.V., Shishkonakov F.A., Vasiliev D.V., Ryabova E.I., Derkaev A.A., Gosudarev A.I., Efimova Y.А., Shcheblyakov D.V., Karpov A.P., Esmagambetov I.B., 20262026Полянский Д.С., Прокофьев В.В., Саморукова А.В., Шишконаков Ф.А., Васильев Д.В., Рябова Е.И., Деркаев А.А., Государев А.И., Ефимова Ю.А., Щебляков Д.В., Карпов А.П., Есмагамбетов И.Б.Polyansky D.S., Prokofiev V.V., Samorukova A.V., Shishkonakov F.A., Vasiliev D.V., Ryabova E.I., Derkaev A.A., Gosudarev A.I., Efimova Y.А., Shcheblyakov D.V., Karpov A.P., Esmagambetov I.B.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.finechem-mirea.ru/jour/article/view/2387Objectives

Objectives. The work set out to develop a chromatographic purification technology for drugs based on modified single-domain antibodies specific to the SARS-CoV-2 virus, as well as to select the optimal parameters for the purification process and scale up this technology for production.

Methods

Methods. The study was conducted on a culture of Chinese hamster ovary (CHO) cells GAMP2C5  clone 78, CHO B5 clone 4, and CHO B10 clone 4, which were used to produce modified single-domain antibodies GAMP2C5, GAMB5, and GAMB10, respectively. Chromatographic purification was performed using AKTA pure 25 and AKTA Pilot 600s chromatographs. Quality control of the obtained drugs was carried out using high-performance liquid chromatography, capillary gel electrophoresis, dynamic light scattering, enzymelinked immunosorbent assay, and polymerase chain reaction.

Results

Results. Multimodal chromatography using CA++Pure-HA (TOSOH, Japan) resin based on type 1 ceramic hydroxyapatite can be effectively used for the removal of aggregated antibody forms. The drugs obtained after chromatography using CA++Pure-HA resin based on type 1 ceramic hydroxyapatite have a purity of more than 97%. The developed purification technology was scaled up to purify 200 L of culture fluid after cultivation in an STR 200 bioreactor.

Conclusions

Conclusions. The described technology developed for purifying modified mono-domain antibodies using the CA++Pure-HA multimodal resin based on type 1 ceramic hydroxyapatite allows for the effective removal of low-molecular-weight impurities and aggregated forms of the antibody. The antibodies obtained using the developed technology are characterized by a high degree of purity and the absence of various impurities (residual protein of the producer strain, residual protein A, and residual DNA of the producer strain), as well as offering a hydrodynamic molecular radius corresponding to the theoretical value of monomeric forms of antibodies.

Цели

Цели. Разработать технологию хроматографической очистки для препаратов на основе модифицированных однодоменных антител, специфичных к вирусу SARS-CoV-2. Подобрать оптимальные параметры процесса очистки и масштабировать данную технологию на производстве.

Методы

Методы. Исследование проводилось на культуре клеток яичников китайского хомячка CHO GAMP2C5  клон 78, СНО B5 клон 4, СНО B10 клон 4, продуцирующих модифицированные однодоменные антитела GAMP2C5, GAMB5, GAMB10 соответственно. Хроматографическая очистка проводилась с применением хроматографов AKTA Pure 25 и AKTA Pilot 600s. Контроль качества полученных препаратов был осуществлен при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии, капиллярного гель-электрофореза, динамического рассеяния света, иммуноферментного анализа, полимеразной цепной реакции.

Результаты

Результаты. Мультимодальная хроматография с применением сорбента Ca++Pure-HA (TOSOH, Япония) на основе керамического гидроксиапатита 1 типа позволяет эффективно избавляться от агрегированных форм антитела. Препараты, полученные после хроматографии с применением сорбента Ca++Pure-HA на основе керамического гидроксиапатита 1, имеют чистоту более 97%. Разработанная технология очистки была масштабирована до очистки объемом 200 л культуральной жидкости после культивирования в биореакторе STR 200.

Выводы

Выводы. Разработана технология очистки модифицированных однодоменных антител с применением мультимодального сорбента Ca++Pure-HA на основе керамического гидроксиапатита 1 типа, позволяющая эффективно избавляться от низкомолекулярных примесей и агрегированных форм антитела. Полученные с помощью разработанной технологии антитела характеризуются высокой степенью чистоты, отсутствием различных примесей (остаточного белка штамма продуцента, остаточного белка А и остаточного ДНК штамма продуцента), а также обладают гидродинамическим радиусом молекул, соответствующим теоретическому значению мономерной форм антител.

хроматографическая очисткакармический гидроксиапатит 1 типамультимодальная хроматографияразработка технологии очисткимасштабированиеchromatographic purificationtype 1 karmic hydroxyapatitemultimodal chromatographypurification technology developmentscalingReferencesMekala J.R., Nalluri H.P., Reddy P.N., Sainath S.B., Sampath Kumar N.S., Sai Kiran G.V.S.D., Dhiman R., Chamarthy S., Komaragiri R.R., Manyam R.R., Dirisala V.R. Emerging trends and therapeutic applications of monoclonal antibodies. Gene. 2024;20(925):148607. https://doi.org/10.1016/j.gene.2024.148607Mekala J.R., Nalluri H.P., Reddy P.N., Sainath S.B., Sampath Kumar N.S., Sai Kiran G.V.S.D., Dhiman R., Chamarthy S., Komaragiri R.R., Manyam R.R., Dirisala V.R. Emerging trends and therapeutic applications of monoclonal antibodies. Gene. 2024;20(925):148607. https://doi.org/10.1016/j.gene.2024.148607Esposito S., Amirthalingam G., Bassetti M., Blasi F., De Rosa F.G., Halasa N.B., Principi N. Monoclonal antibodies for prophylaxis and therapy of respiratory syncytial virus, SARS-CoV-2, human immunodeficiency virus, rabies and bacterial infections: An update from the world association of infectious diseases and immunological disorders and the Italian society of antinfective therapy. Front. Immunol. 2023;14:1162342. https://doi.org/10.3389/fimmu.2023.1162342Esposito S., Amirthalingam G., Bassetti M., Blasi F., De Rosa F.G., Halasa N.B., Principi N. Monoclonal antibodies for prophylaxis and therapy of respiratory syncytial virus, SARS-CoV-2, human immunodeficiency virus, rabies and bacterial infections: An update from the world association of infectious diseases and immunological disorders and the Italian society of antinfective therapy. Front. Immunol. 2023;14:1162342. https://doi.org/10.3389/fimmu.2023.1162342Wang Z., Wang G., Lu H., Li H., Tang M., Tong A. Development of therapeutic antibodies for the treatment of diseases. Mol. Biomed. 2022;3:35. https://doi.org/10.1186/S43556-022-00100-4Wang Z., Wang G., Lu H., Li H., Tang M., Tong A. Development of therapeutic antibodies for the treatment of diseases. Mol. Biomed. 2022;3:35. https://doi.org/10.1186/S43556-022-00100-4Paul S., Konig M.F., Pardoll D.M., Bettegowda C., Papadopoulos N., Wright K.M., Gabelli S.B., Ho M., van Elsas A., Zhou S. Cancer therapy with antibodies. Nature Reviews Cancer. 2024;24(6):399–426. https://doi.org/10.1038/s41568-024-00690-xPaul S., Konig M.F., Pardoll D.M., Bettegowda C., Papadopoulos N., Wright K.M., Gabelli S.B., Ho M., van Elsas A., Zhou S. Cancer therapy with antibodies. Nature Reviews Cancer. 2024;24(6):399–426. https://doi.org/10.1038/s41568-024-00690-xKumar M., Jalota A., Sahu S.K., Haque S. Therapeutic antibodies for the prevention and treatment of cancer. J. Biomed. Sci. 2024;31(1):6. https://doi.org/10.1186/s12929-024-00996-wKumar M., Jalota A., Sahu S.K., Haque S. Therapeutic antibodies for the prevention and treatment of cancer. J. Biomed. Sci. 2024;31(1):6. https://doi.org/10.1186/s12929-024-00996-wKügler M., Stein C., Schwenkert M., Saul D., Vockentanz L., Huber T., et al. Stabilization and humanization of a singlechain Fv antibody fragment specific for human lymphocyte antigen CD19 by designed point mutations and CDR-grafting onto a human framework. Protein Eng. Des. Sel. 2009;22(3): 135–147. https://doi.org/10.1093/protein/gzn079Kügler M., Stein C., Schwenkert M., Saul D., Vockentanz L., Huber T., et al. Stabilization and humanization of a singlechain Fv antibody fragment specific for human lymphocyte antigen CD19 by designed point mutations and CDR-grafting onto a human framework. Protein Eng. Des. Sel. 2009;22(3): 135–147. https://doi.org/10.1093/protein/gzn079Jin B.K., Odongo S., Radwanska M., Magez S. Nanobodies: A review of generation, diagnostics and therapeutics. Int. J. Mol. Sci. 2023;24(6):5994. https://doi.org/10.3390/IJMS24065994Jin B.K., Odongo S., Radwanska M., Magez S. Nanobodies: A review of generation, diagnostics and therapeutics. Int. J. Mol. Sci. 2023;24(6):5994. https://doi.org/10.3390/IJMS24065994Klein C., Brinkmann U., Reichert J.M., Kontermann R.E. The present and future of bispecific antibodies for cancer therapy. Nat. Rev. Drug Discov. 2024;23(4):301–319. https://doi.org/10.1038/s41573-024-00896-6Klein C., Brinkmann U., Reichert J.M., Kontermann R.E. The present and future of bispecific antibodies for cancer therapy. Nat. Rev. Drug Discov. 2024;23(4):301–319. https://doi.org/10.1038/s41573-024-00896-6Wang M., Ying T., Wu Y. Single-domain antibodies as therapeutics for solid tumor treatment. Acta Pharmaceutica Sinica B. 2024;14(7):2854–2868. https://doi.org/10.1016/j.apsb.2024.03.016Wang M., Ying T., Wu Y. Single-domain antibodies as therapeutics for solid tumor treatment. Acta Pharmaceutica Sinica B. 2024;14(7):2854–2868. https://doi.org/10.1016/j.apsb.2024.03.016Cheng L., Chen L., Shi Y., Gu W., Ding W., Zheng X., Liu Y., Jiang J., Zheng Z. Efficacy and safety of bispecific antibodies vs. immune checkpoint blockade combination therapy in cancer: A real-world comparison. Mol. Cancer. 2024;23(1):77. https://doi.org/10.1186/s12943-024-01956-6Cheng L., Chen L., Shi Y., Gu W., Ding W., Zheng X., Liu Y., Jiang J., Zheng Z. Efficacy and safety of bispecific antibodies vs. immune checkpoint blockade combination therapy in cancer: A real-world comparison. Mol. Cancer. 2024;23(1):77. https://doi.org/10.1186/s12943-024-01956-6Zacharias N., Podust V.N., Kajihara K.K., Leipold D., Del Rosario G., Thayer D., Dong E., Paluch M., Fischer D., Zheng K., Lei C. A homogeneous high-DAR antibody–drug conjugate platform combining THIOMAB antibodies and XTEN polypeptides. Chem. Sci. 2022;13(11):3147–3160. https://doi.org/10.1039/D1SC05243HZacharias N., Podust V.N., Kajihara K.K., Leipold D., Del Rosario G., Thayer D., Dong E., Paluch M., Fischer D., Zheng K., Lei C. A homogeneous high-DAR antibody–drug conjugate platform combining THIOMAB antibodies and XTEN polypeptides. Chem. Sci. 2022;13(11):3147–3160. https://doi.org/10.1039/D1SC05243HПолянский Д.С., Рябова Е.И., Деркаев А.А., Старков Н.С., Кашапова И.С., Щебляков Д.В., Карпов А.П., Есмагамбетов И.Б. Разработка технологии культивирования клеточной линии, продуцирующей однодоменное антитело, слитое с Fc-фрагментом IgG1 человека. Тонкие химические технологии. 2024;19(3): 240–257. https://doi.org/10.32362/2410-6593-2024-19-3-240-257Polyansky D.S., Ryabova E.I., Derkaev A.A., Starkov N.S., Kashapova I.S., Shcheblyakov D.V., Karpov A.P., Esmagambetov I.B. Development of technology for culturing a cell line producing a single-domain antibody fused with the Fc fragment of human IgG1. Tonk. Khim. Tekhnol. = Fine Chem. Technol. 2024;19(3):240–257. https://doi.org/10.32362/2410-6593-2024-19-3-240-257Kelley B. Industrialization of mAb production technology: The bioprocessing industry at a crossroads. MAbs. 2009;1(5): 443–452. https://doi.org/10.4161/mabs.1.5.9448Kelley B. Industrialization of mAb production technology: The bioprocessing industry at a crossroads. MAbs. 2009;1(5): 443–452. https://doi.org/10.4161/mabs.1.5.9448Ulmer N., Vogg S., Müller-Späth T., Morbidelli M. Purification of Human Monoclonal Antibodies and Their Fragments. In: Steinitz M. (Ed.). Human Monoclonal Antibodies. Methods in Molecular Biology. 2019. V. 1904. P. 163–188. https://doi.org/10.1007/978-1-4939-8958-4_7Ulmer N., Vogg S., Müller-Späth T., Morbidelli M. Purification of Human Monoclonal Antibodies and Their Fragments. In: Steinitz M. (Ed.). Human Monoclonal Antibodies. Methods in Molecular Biology. 2019. V. 1904. P. 163–188. https://doi.org/10.1007/978-1-4939-8958-4_7Есмагамбетов И.Б., Щебляков Д.В., Егорова Д.А., Воронина О.Л., Деркаев А.А., Воронина Д.В., Попова О., Рябова Е.И., Щербинин Д.Н., Аксенова Е.И., Семенов А.Н., Кунда М.С., Рыжова Н.Н., Зубкова О.В., Тухватулин А.И., Логунов Д.Ю., Народицкий Б.С., Борисевич С.В., Гинцбург А.Л. Наноантитела – потенциальный терапевтический препарат против лихорадки Эбола. Acta Naturae. 2021;13(4):53–63. https://doi.org/10.32607/actanaturae.11487Esmagambetov I.B., Shcheblyakov D.V., Egorova D.A., Voronina O.L., Derkaev A.A., Voronina D.V., Popova O., Ryabova E.I., Shcherbinin D.N., Aksenova E.I., Semenov A.N., Kunda M.S., Ryzhova N.N., Zubkova O.V., Tukhvatulin A.I., Logunov D.Y., Naroditsky B.S., Borisevich S.V., Gintsburg A.L. Nanobodies Are Potential Therapeutic Agents for the Ebola Virus Infection. Acta Naturae. 2021;13(4):53–63. https://doi.org/10.32607/actanaturae.11487 ]Derkaev A.A., Ryabova E.I., Esmagambetov I.B., Shcheblyakov D.V., Godakova S.A., Vinogradova I.D., Noskov A.N., Logunov D.Y., Naroditsky B.S., Gintsburg A.L. rAAV expressing recombinant neutralizing antibody for the botulinum neurotoxin type a prophylaxis. Front. Microbiol. 2022;13:960937. https://doi.org/10.3389/fmicb.2022.960937Derkaev A.A., Ryabova E.I., Esmagambetov I.B., Shcheblyakov D.V., Godakova S.A., Vinogradova I.D., Noskov A.N., Logunov D.Y., Naroditsky B.S., Gintsburg A.L. rAAV expressing recombinant neutralizing antibody for the botulinum neurotoxin type a prophylaxis. Front. Microbiol. 2022;13:960937. https://doi.org/10.3389/fmicb.2022.960937Voronina D.V., Shcheblyakov D.V., Favorskaya I.A., Esmagambetov I.B., Dzharullaeva A.S., Tukhvatulin A.I., Zubkova O.V., Popova O., Kan V.Y., Bandelyuk A.S., Shmarov M.M., Logunov D.Y., Naroditskiy B.S., Gintsburg A.L. Cross-Reactive Fc-Fused Single-Domain Antibodies to Hemagglutinin Stem Region Protect Mice from Group 1 Influenza a Virus Infection. Viruses. 2022;14(11):2485. https://doi.org/10.3390/v14112485Voronina D.V., Shcheblyakov D.V., Favorskaya I.A., Esmagambetov I.B., Dzharullaeva A.S., Tukhvatulin A.I., Zubkova O.V., Popova O., Kan V.Y., Bandelyuk A.S., Shmarov M.M., Logunov D.Y., Naroditskiy B.S., Gintsburg A.L. Cross-Reactive Fc-Fused Single-Domain Antibodies to Hemagglutinin Stem Region Protect Mice from Group 1 Influenza a Virus Infection. Viruses. 2022;14(11):2485. https://doi.org/10.3390/v14112485Panova E.A., Kleymenov D.A., Shcheblyakov D.V., Bykonia E.N., Mazunina E.P., Dzharullaeva A.S., Zolotar A.N., Derkaev A.A., Esmagambetov I.B., Sorokin I.I., Usachev E.V., Noskov A.N., Ivanov I.A., Zatsepin T.S., Dmitriev S.E., Gushchin V.A., Naroditsky B.S., Logunov D.Y., Gintsburg A.L. Single-domain antibody delivery using an mRNA platform protects against lethal doses of botulinum neurotoxin A. Front. Immunol. 2023;14:1098302. https://doi.org/10.3389/fimmu.2023.1098302Panova E.A., Kleymenov D.A., Shcheblyakov D.V., Bykonia E.N., Mazunina E.P., Dzharullaeva A.S., Zolotar A.N., Derkaev A.A., Esmagambetov I.B., Sorokin I.I., Usachev E.V., Noskov A.N., Ivanov I.A., Zatsepin T.S., Dmitriev S.E., Gushchin V.A., Naroditsky B.S., Logunov D.Y., Gintsburg A.L. Single-domain antibody delivery using an mRNA platform protects against lethal doses of botulinum neurotoxin A. Front. Immunol. 2023;14:1098302. https://doi.org/10.3389/fimmu.2023.1098302Godakova S.A., Noskov A.N., Vinogradova I.D., Ugriumova G.A., Solovyev A.I., Esmagambetov I.B., Tukhvatulin AI., Logunov D.Y., Naroditsky B.S., Shcheblyakov D.V., Gintsburg A.L. Camelid VHHs Fused to Human Fc Fragments Provide Long Term Protection Against Botulinum Neurotoxin A in Mice. Toxins (Basel). 2019;11(8):464. https://doi.org/10.3390/toxins11080464Godakova S.A., Noskov A.N., Vinogradova I.D., Ugriumova G.A., Solovyev A.I., Esmagambetov I.B., Tukhvatulin AI., Logunov D.Y., Naroditsky B.S., Shcheblyakov D.V., Gintsburg A.L. Camelid VHHs Fused to Human Fc Fragments Provide Long Term Protection Against Botulinum Neurotoxin A in Mice. Toxins (Basel). 2019;11(8):464. https://doi.org/10.3390/toxins11080464Esmagambetov I.B., Ryabova E.I., Derkaev A.A., Shcheblyakov D.V., Dolzhikova I.V., Favorskaya I.A.,Esmagambetov I.B., Ryabova E.I., Derkaev A.A., Shcheblyakov D.V., Dolzhikova I.V., Favorskaya I.A., Grousova D.M., Dovgiy M.A., Prokofiev V.V., Gosudarev A.I., Byrikhina D.V., Zorkov I.D., Iliukhina A.A., Kovyrshina A.V., Shelkov A.Y., Naroditsky B.S., Logunov D.Y., Gintsburg A.L. rAAV expressing recombinant antibody for emergency prevention and long-term prophylaxis of COVID-19. Front. Immunol. 2023;14:1129245. https://doi.org/10.3389/fimmu.2023.1129245Grousova D.M., Dovgiy M.A., Prokofiev V.V., Gosudarev A.I., Byrikhina D.V., Zorkov I.D., Iliukhina A.A., Kovyrshina A.V., Shelkov A.Y., Naroditsky B.S., Logunov D.Y., Gintsburg A.L. rAAV expressing recombinant antibody for emergency prevention and long-term prophylaxis of COVID-19. Front. Immunol. 2023;14:1129245. https://doi.org/10.3389/fimmu.2023.1129245Favorskaya I.A., Shcheblyakov D.V., Esmagambetov I.B., Dolzhikova I.V., Alekseeva I.A., Korobkova A.I., Voronina D.V., Ryabova E.I., Derkaev A.A., Kovyrshina A.V., et al. Single-Domain Antibodies Efficiently Neutralize SARS-CoV-2 Variants of Concern. Front. Immunol. 2022;13:822159. https://doi.org/10.3389/fimmu.2022.822159Favorskaya I.A., Shcheblyakov D.V., Esmagambetov I.B., Dolzhikova I.V., Alekseeva I.A., Korobkova A.I., Voronina D.V., Ryabova E.I., Derkaev A.A., Kovyrshina A.V., et al. Single-Domain Antibodies Efficiently Neutralize SARS-CoV-2 Variants of Concern. Front. Immunol. 2022;13:822159. https://doi.org/10.3389/fimmu.2022.822159Shcheblyakov D.V., Favorskaya I.A., Dolzhikova I.V., Korobkova A.I., Esmagambetov I.V., Voronina O.L., Zubkova O.V., Tukhvatulin A.I., Derkaev A.A., Ryabova E.I., Iliukhina A.A., Zorkov I.D., Grousova D.M., Reshetnikov D.A., Ryzhova N.N., Ermolova E.I., Kunda M.S., Matyuta I.O., Boyko K.M., Gintsburg A.L. Ultra-potent RBM-specific singledomain antibody broadly neutralizes multiple SARS-CoV-2 variants with picomolar activity. Int. J. Biol. Macromol. 2025; 19(Pt 3):145386. https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2025.145386Shcheblyakov D.V., Favorskaya I.A., Dolzhikova I.V., Korobkova A.I., Esmagambetov I.V., Voronina O.L., Zubkova O.V., Tukhvatulin A.I., Derkaev A.A., Ryabova E.I., Iliukhina A.A., Zorkov I.D., Grousova D.M., Reshetnikov D.A., Ryzhova N.N., Ermolova E.I., Kunda M.S., Matyuta I.O., Boyko K.M., Gintsburg A.L. Ultra-potent RBM-specific singledomain antibody broadly neutralizes multiple SARS-CoV-2 variants with picomolar activity. Int. J. Biol. Macromol. 2025; 19(Pt 3):145386. https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2025.145386Sedova E.S., Shcherbinin D.N., Bandelyuk A.S., Verkhovskaya L.V., Viskova N.Yu., Avdonina E.D., Prokofiev V.V., Ryabova E.I., Esmagambetov I.B., Pervoykina K.A., Bogacheva E.A., Lysenko A.A., Shmarov M.M. Method for obtaining recombinant antibodies produced by a cell line transduced with recombinant adenoviruses. Tonk. Khim. Tekhnol. = Fine Chem. Technol. 2023;18(1):48–64. https://doi.org/10.32362/2410-6593-2023-18-1-48-64Седова Е.С., Щербинин Д.Н., Банделюк А.С., Верховская Л.В., Вискова Н.Ю., Авдонина Е.Д., Прокофьев В.В., Рябова Е.И., Есмагамбетов И.Б., Первойкина К.А., Богачева Е.А., Лысенко А.А., Шмаров М.М. Способ получения рекомбинантных антител, продуцируемых клеточной линией, трансдуцированной рекомбинантными аденовирусами. Тонкие химические технологии. 2023;18(1):48–64. https://doi.org/10.32362/2410-6593-2023-18-1-48-64Derkaev A.A., Ryabova E.I., Esmagambetov I.B., Shcheblyakov D.V., Noskov A.N., Vinogradova I.D., Prokofiev V.V., Polyansky D.S., Logunov D.Y., Gintsburg A.L. A modified single-domain antibody candidate for the treatment of botulism caused by botulinum toxin type A. BIOpreparaty. Profilaktika, diagnostika, lechenie = BIOpreparations. Prevention, Diagnosis, Treatment. 2025;25(1):58–70 (in Russ.). https://doi.org/10.30895/2221-996X-2025-591Деркаев А.А., Рябова Е.И., Есмагамбетов И.Б., Щебляков Д.В., Носков А.Н., Виноградова И.Д., Прокофьев В.В., Полянский Д.С.., Логунов Д.Ю., Гинцбург А.Л. Кандидатный препарат на основе модифицированных однодоменных антител для терапии ботулизма, вызванного ботулиническим токсином типа А. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2025;25(1):58–70. https://doi.org/10.30895/2221-996X-2025-591Деркаев А.А., Рябова Е.И., Есмагамбетов И.Б., Щебляков Д.В., Носков А.Н., Виноградова И.Д., Прокофьев В.В., Полянский Д.С.., Логунов Д.Ю., Гинцбург А.Л. Кандидатный препарат на основе модифицированных однодоменных антител для терапии ботулизма, вызванного ботулиническим токсином типа А. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2025;25(1):58–70. https://doi.org/10.30895/2221-996X-2025-591

The authors declare that there are no conflicts of interest present.