chemicallytechFine Chemical TechnologiesТонкие химические технологии2410-65932686-7575MIREA – Russian Technological University (RTU MIREA).10.32362/2410-6593-2025-20-6-582-593VKKHOPchemicallytech-2336Research ArticleBIOCHEMISTRY AND BIOTECHNOLOGYБИОХИМИЯ И БИОТЕХНОЛОГИЯComparative analysis of three genetic constructs for delivery and expression of a modified single-domain antibody gene in rAAVСравнительный анализ трех генетических конструкций для доставки и экспрессии гена модифицированного однодоменного антитела в составе rAAVhttps://orcid.org/0000-0002-2687-5185РябоваЕ. И.RyabovaE. I.

Рябова Екатерина Игоревна, младший научный сотрудник, лаборатория иммунобиотехнологии; аспирант, ФГБОУ ВО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии – МВА имени К.И. Скрябина» 

Scopus Author ID 57301278100, ResearcherID AAE-7335-2022

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Ekaterina I. Ryabova, Junior Researcher, Laboratory of Immunobiotechnology

Scopus Author ID 57301278100, ResearcherID AAE-7335-2022

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

ryabovaei96@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0003-3776-3856ДеркаевА. А.DerkaevA. A.

Деркаев Артем Алексеевич, младший научный сотрудник, лаборатория иммунобиотехнологии

Scopus Author ID 57381507000, ResearcherID AFU-7075-2022

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

 

Artem A. Derkaev, Junior Researcher, Laboratory of Immunobiotechnology

Scopus Author ID 57381507000, ResearcherID AFU-7075-2022

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

derkaev.a@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-2063-2449ЕсмагамбетовИ. Б.EsmagambetovI. B.

Есмагамбетов Ильяс Булатович, к.б.н., ведущий научный сотрудник, заведующий лабораторией стромальной регуляции иммунитета

Scopus Author ID 56120429700, ResearcherID E-3327-2014

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Ilias B. Esmagambetov, Cand. Sci. (Biol.), Leading Researcher, Head of the Laboratory of Stromal Regulation of Immunity

Scopus Author ID 56120429700, ResearcherID E-3327-2014

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

iesmagambetov@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-0017-7784ДовгийМ. А.DovgiyM. A.

Довгий Михаил Андреевич, младший научный сотрудник, лаборатория иммунобиотехнологии

ResearcherID AFV-2114-2022

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Mikhail A. Dovgiy, Junior Researcher, Laboratory of Immunobiotechnology

ResearcherID AFV-2114-2022

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

imhail@yandex.ruhttps://orcid.org/0009-0005-9866-7376БлиновА. А.BlinovA. A.

Блинов Антон Анатольевич, лаборант исследователь, лаборатория стромальной регуляции иммунитета

ResearcherID OCL-6033-2025

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Anton A. Blinov, Laboratory Research Assistant, Laboratory of Stromal Regulation of Immunity

ResearcherID OCL-6033-2025

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

blinow.t@gmail.comhttps://orcid.org/0009-0009-4483-2697ХоссаинР. М.HossainR. M.

Хоссаин Роза Махбубовна, младший научный сотрудник, лаборатория стромальной регуляции иммунитета

ResearcherID OCL-6134-2025

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Roza M. Hossain, Junior Researcher, Laboratory of Stromal Regulation of Immunity

ResearcherID OCL-6134-2025

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

xossain2013@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0003-3709-8358ДмитриевО. Е.DmitrievO. E.

Дмитриев Олег Евгеньевич, ведущий инженер, лаборатория стромальной регуляции иммунитета

ResearcherID ODJ-2714-2025

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Oleg E. Dmitriev, Leading Engineer, Laboratory of Stromal Regulation of Immunity

ResearcherID ODJ-2714-2025

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

d.e.oleg.work@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0003-0792-7063ПолянскийД. С.PolyanskyD. S.

Полянский Дмитрий Сергеевич, ассистент, кафедра аналитической химии им. И.П. Алимарина

Scopus Author ID 57890564200

119454, Москва, пр-т Вернадского, д. 78

Dmitry S. Polyansky, Assistant Professor, I.P. Alimarin Department of Analytical Chemistry

Scopus Author ID 57890564200

78, Vernadskogo pr., Moscow, 119545

polanskiydmitriy15@gmail.comНосковА. Н.NoskovA. N.

Носков Анатолий Николаевич, д.б.н., ведущий научный сотрудник, лаборатория иммунобиотехнологии

Scopus Author ID 7005685081

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Anatoly N. Noskov, Dr. Sci. (Biol.), Leading Researcher, Laboratory of Immunobiotechnology

Scopus Author  ID 7005685081

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

a_n_noskov@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-1289-3411ЩебляковД. В.ShcheblyakovD. V.

Щебляков Дмитрий Викторович, д.б.н., ведущий научный сотрудник, руководитель отдела генетики и молекулярной биологии бактерий, заведующий лабораторией иммунобиотехнологии

Scopus Author ID 35073056900, ResearcherID E-5899-2014

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Dmitry V. Shcheblyakov, Dr. Sci. (Biol.), Leading Researcher, Head of the Department of Genetics and Molecular Biology of Bacteria, Head of the Laboratory of Immunobiotechnology

Scopus Author ID 35073056900, ResearcherID E-5899-2014

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

sdmitryv@yahoo.comhttps://orcid.org/0000-0003-4035-6581ЛогуновД. Ю.LogunovD. Y.

Логунов Денис Юрьевич, д.б.н., академик Российской академии наук, заместитель директора по научной работе

Scopus Author ID 22835557900, ResearcherID E-8300-2014

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Denis Y. Logunov, Academician at the Russian Academy of Sciences, Dr. Sci. (Biol.), Deputy Director for Research

Scopus Author ID 22835557900, ResearcherID E-8300-2014

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

ldy78@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0003-1769-5059ГинцбургА. Л.GintsburgA. L.

Гинцбург Александр Леонидович, академик Российской академии наук, академик Российской академии медицинских наук, д.б.н., профессор, директор 

Scopus Author ID 7005111491

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Alexander L. Gintsburg, Academician at the Russian Academy of Sciences, Academician at the Russian Academy of Medical Sciences, Dr. Sci. (Biol.), Professor, Director 

Scopus Author ID 7005111491

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

gintsburg@gamaleya.orgНациональный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи Министерства Здравоохранения Российской ФедерацииРоссияN.F. Gamaleya National Research Center for Epidemiology and Microbiology, Ministry of Health of the Russian FederationRussian FederationМИРЭА – Российский технологический университет (Институт тонких химических технологий им. М.В. Ломоносова)РоссияMIREA – Russian Technological University (M.V. Lomonosov Institute of Fine Chemical Technologies)Russian Federation202515012026206582593Copyright © Ryabova E.I., Derkaev A.A., Esmagambetov I.B., Dovgiy M.A., Blinov A.A., Hossain R.M., Dmitriev O.E., Polyansky D.S., Noskov A.N., Shcheblyakov D.V., Logunov D.Y., Gintsburg A.L., 20262026Рябова Е.И., Деркаев А.А., Есмагамбетов И.Б., Довгий М.А., Блинов А.А., Хоссаин Р.М., Дмитриев О.Е., Полянский Д.С., Носков А.Н., Щебляков Д.В., Логунов Д.Ю., Гинцбург А.Л.Ryabova E.I., Derkaev A.A., Esmagambetov I.B., Dovgiy M.A., Blinov A.A., Hossain R.M., Dmitriev O.E., Polyansky D.S., Noskov A.N., Shcheblyakov D.V., Logunov D.Y., Gintsburg A.L.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.finechem-mirea.ru/jour/article/view/2336Objectives

Objectives. To obtain and compare the efficiency of three recombinant adeno-associated virus (rAAV) variants expressing the gene of the modified single-domain antibody B11-Fc specific to botulinum toxin type A (BoNT/A): rAAV-DJ-CMV-B11-Fc, rAAV-DJ-CASI-B11-Fc, and scAAV-DJ-CMV-B11-Fc.

Methods

Methods. The AAV-DJ Packaging System (Cell Biolabs, USA) was used to create target constructs and obtain rAAV. Expression of the B11-Fc antibody gene in the obtained rAAV was assessed in vitro (HEK293, CHO-S, and C2C12 cell lines) and in vivo (BALB/c mice) using biolayer interferometry. The protective properties of the drugs were investigated on the model of lethal intoxication of mice with

BoNT/A

BoNT/A.

Results

Results. The rAAV-DJ-CMV-B11-Fc drug demonstrated a high level of B11-Fc antibody production both in vitro and in vivo without a significant decrease in concentration for at least 6 months. Comparable levels of B11-Fc production were demonstrated by rAAV-DJ-CASI-B11-Fc and scAAV-DJ-CMV-B11-Fc drugs in both in vitro and in vivo studies, with the exception of C2C12 cells, where rAAV-DJ-CASI-B11-Fc demonstrated the highest efficacy. When investigating the protective activity of the drugs against a lethal dose of BoNT/A, it was found that rAAV-DJ-CASI-B11-Fc possessed more pronounced activity in the first two days following administration as compared to rAAV-DJ-CMV-B11-Fc. However, at later stages, starting from 3 months, the rAAV-DJ-CMV-B11-Fc drug product demonstrated the most pronounced protection against high doses of BoNT/A.

Conclusions

Conclusions. The obtained data show that rAAV-DJ-CASI-B11-Fc should be used for the induction of protection against BoNT/A at early stages (24–48 h) after administration, whereas for protection against the highest doses of BoNT/A in the long term, rAAV-DJ-CMV-B11-Fc should be used. Studies into the specific activity of the drugs at later stages after administration are still ongoing.

Цели

Цели. Получить и сравнить эффективность трех вариантов rAAV, экспрессирующих ген модифицированного однодоменного антитела B11-Fc, специфичного к ботулиническому токсину типа А (BoNT/A) — rAAV-DJ-CMV-B11-Fc, rAAV-DJ-CASI-B11-Fc и scAAV-DJ-CMV-B11-Fc.

Методы

Методы. Для создания целевых конструкций и получения rAAV использовали систему AAV-DJ Packaging System (Cell Biolabs, США). Экспрессию гена антитела B11-Fc в составе полученных rAAV оценивали in vitro (клеточные линии HEK293, CHO-S и C2C12) и in vivo (мыши линии BALB/c) при помощи биослойной интерферометрии. Защитные свойства препаратов изучали на модели летальной интоксикации мышей BoNT/A.

Результаты

Результаты. Препарат rAAV-DJ-CMV-B11-Fc показал высокий уровень продукции антитела B11-Fc как in vitro, так и in vivo без значимого снижения концентрации в течение как минимум 6 месяцев. Препараты rAAV-DJ-CASI-B11-Fc и scAAV-DJ-CMV-B11-Fc показали сравнимый уровень продукции B11-Fc как in vitro и in vivo, за исключением клеток C2C12, где rAAV-DJ-CASI-B11-Fc показал самую высокую эффективность. При изучении защитной активности препаратов против летальной дозы BoNT/A продемонстрировано, что в первые двое суток rAAV-DJ-CASI-B11-Fc и scAAV-DJ-CMV-B11-Fc обладают более выраженной активностью по сравнению с rAAV-DJ-CMV-B11-Fc. Однако на более поздних сроках, начиная с 3 месяца, препарат rAAV-DJ-CMV-B11-Fc демонстрирует наиболее выраженную защиту против высоких доз BoNT/A.

Выводы

Выводы. Полученные в ходе исследования данные показывают, что для индукции защиты от BoNT/A на ранних сроках (24–48 ч) после введения следует применять препарат rAAV-DJ-CASI-B11-Fc, тогда как для индукции защиты от максимально высоких доз BoNT/A в долгосрочной перспективе следует использовать rAAV-DJ-CMV-B11-Fc. Исследования специфической активности препаратов на более поздних сроках после введения продолжаются.

аденоассоциированный вирусоднодоменные антителаботулизмпассивная иммунизацияпрофилактикаrAAVadeno-associated virussingle-domain antibodiesbotulismpassive immunizationprophylaxisReferencesLaursen N.S., Friesen R.H., Zhu X., Jongeneelen M., Blokland S., Vermond J., Van Eijgen A., Tang C., Van Diepen H., Obmolova G., van der Neut Kolfschoten M., et al. Universal protection against influenza infection by a multidomain antibody to influenza hemagglutinin. Science. 2018;362(6414):598–602. https://doi.org/10.1126/science.aaq0620Laursen N.S., Friesen R.H., Zhu X., Jongeneelen M., Blokland S., Vermond J., Van Eijgen A., Tang C., Van Diepen H., Obmolova G., van der Neut Kolfschoten M., et al. Universal protection against influenza infection by a multidomain antibody to influenza hemagglutinin. Science. 2018;362(6414):598–602. https://doi.org/10.1126/science.aaq0620Esmagambetov I.B., Ryabova E.I., Derkaev A.A., Shcheblyakov D.V., Dolzhikova I.V., Favorskaya I.A., et al. rAAV expressing recombinant antibody for emergency prevention and long-term prophylaxis of COVID-19. Front. Immunol. 2023;14:1129245. https://doi.org/10.3389/fimmu.2023.1129245Esmagambetov I.B., Ryabova E.I., Derkaev A.A., Shcheblyakov D.V., Dolzhikova I.V., Favorskaya I.A., et al. rAAV expressing recombinant antibody for emergency prevention and long-term prophylaxis of COVID-19. Front. Immunol. 2023;14:1129245. https://doi.org/10.3389/fimmu.2023.1129245Derkaev A.A., Ryabova E.I., Esmagambetov I.B., Shcheblyakov D.V., Godakova S.A., Vinogradova I.D., Noskov A.N., Logunov D.Y., Naroditsky B.S., Gintsburg A.L. rAAV expressing recombinant neutralizing antibody for the botulinum neurotoxin type a prophylaxis. Front. Microbiol. 2022;13:960937. https://doi.org/10.3389/fmicb.2022.960937Derkaev A.A., Ryabova E.I., Esmagambetov I.B., Shcheblyakov D.V., Godakova S.A., Vinogradova I.D., Noskov A.N., Logunov D.Y., Naroditsky B.S., Gintsburg A.L. rAAV expressing recombinant neutralizing antibody for the botulinum neurotoxin type a prophylaxis. Front. Microbiol. 2022;13:960937. https://doi.org/10.3389/fmicb.2022.960937Godakova S.A., Noskov A.N., Vinogradova I.D., Ugriumova G.A., Solovyev A.I., Esmagambetov I.B., et al. Camelid VHHs fused to human fc fragments provide long term protection against botulinum neurotoxin a in mice. Toxins. 2019;11(8):464. https://doi.org/10.3390/toxins11080464Godakova S.A., Noskov A.N., Vinogradova I.D., Ugriumova G.A., Solovyev A.I., Esmagambetov I.B., et al. Camelid VHHs fused to human fc fragments provide long term protection against botulinum neurotoxin a in mice. Toxins. 2019;11(8):464. https://doi.org/10.3390/toxins11080464Рябова Е.И., Деркаев А.А., Есмагамбетов И.Б., Щебляков Д.В., Довгий М.А., Бырихина Д.В., Прокофьев В.В., Чемоданова И.П. Сравнение различных технологий получения рекомбинантного аденоассоциированного вируса в лабораторном масштабе. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2021;21(4):266–278. https://doi.org/10.30895/2221-996X-2021-21-4-266-278Ryabova E.I., Derkaev A.A., Esmagambetov I.B., Shcheblyakov D.V., Dovgiy M.A., Byrikhina D.V., Prokofiev V.V., Chemodanova I.P. Comparison of different technologies for producing recombinant adeno-associated virus on a laboratory scale. BIOpreparaty. Profilaktika, diagnostika, lechenie = BIOpreparations. Prevention, Diagnosis, Treatment. 2021;21(4):266–278 (in Russ.). https://doi.org/10.30895/2221-996X-2021-21-4-266-278Деркаев А.А., Рябова Е.И., Есмагамбетов И.Б., Щебляков Д.В., Носков А.Н., Виноградова И.Д., Прокофьев В.В., Полянский Д.С.., Логунов Д.Ю., Гинцбург А.Л. Кандидатный препарат на основе модифицированных однодоменных антител для терапии ботулизма, вызванного ботулиническим токсином типа А. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2025;25(1):58–70. https://doi.org/10.30895/2221-996X-2025-591Derkaev A.A., Ryabova E.I., Esmagambetov I.B., Shcheblyakov D.V., Noskov A.N., Vinogradova I.D., Prokofiev V.V., Polyansky D.S., Logunov D.Y., Gintsburg A.L. A modified single-domain antibody candidate for the treatment of botulism caused by botulinum toxin type A. BIOpreparaty. Profilaktika, diagnostika, lechenie = BIOpreparations. Prevention, Diagnosis, Treatment. 2025;25(1): 58–70 (in Russ.). https://doi.org/10.30895/2221-996X-2025-591Cabrera A., Edelstein H.I., Glykofrydis F., Love K.S., Palacios S., Tycko J., Zhang M., Lensch S., Shields C.E., Livingston M., Weiss R., et al. The sound of silence: Transgene silencing in mammalian cell engineering. Cell Syst. 2022;13(12):950–973. https://doi.org/10.1016/j.cels.2022.11.005Cabrera A., Edelstein H.I., Glykofrydis F., Love K.S., Palacios S., Tycko J., Zhang M., Lensch S., Shields C.E., Livingston M., Weiss R., et al. The sound of silence: Transgene silencing in mammalian cell engineering. Cell Syst. 2022;13(12):950–973. https://doi.org/10.1016/j.cels.2022.11.005Xu L., Daly T., Gao C., Flotte T.R., Song S., Byrne B.J., Sands M.S.., Ponder K.P. CMV-β-actin promoter directs higher expression from an adeno-associated viral vector in the liver than the cytomegalovirus or elongation factor 1α promoter and results in therapeutic levels of human factor X in mice. Human Gene Ther. 2001;12(5):563–573. https://doi.org/10.1089/104303401300042500Xu L., Daly T., Gao C., Flotte T.R., Song S., Byrne B.J., Sands M.S.., Ponder K.P. CMV-β-actin promoter directs higher expression from an adeno-associated viral vector in the liver than the cytomegalovirus or elongation factor 1α promoter and results in therapeutic levels of human factor X in mice. Human Gene Ther. 2001;12(5):563–573. https://doi.org/10.1089/104303401300042500Wang L., Bell P., Somanathan S., Wang Q., He Z., Yu H., McMenamin D., Goode T., Calcedo R., Wilson J.M. Comparative study of liver gene transfer with AAV vectors based on natural and engineered AAV capsids. Mol. Ther. 2015;23(12):1877–1887. https://doi.org/10.1038/mt.2015.179Wang L., Bell P., Somanathan S., Wang Q., He Z., Yu H., McMenamin D., Goode T., Calcedo R., Wilson J.M. Comparative study of liver gene transfer with AAV vectors based on natural and engineered AAV capsids. Mol. Ther. 2015;23(12):1877–1887. https://doi.org/10.1038/mt.2015.179Choi V.W., McCarty D.M., Samulski R.J. AAV hybrid serotypes: Improved vectors for gene delivery. Curr. Gene Ther. 2005;5(3):299–310. https://doi.org/10.2174/1566523054064968Choi V.W., McCarty D.M., Samulski R.J. AAV hybrid serotypes: Improved vectors for gene delivery. Curr. Gene Ther. 2005;5(3):299–310. https://doi.org/10.2174/1566523054064968Wang D., Tai P.W., Gao G. Adeno-associated virus vector as a platform for gene therapy delivery. Nature Rev. Drug Discov. 2019;18(5):358–378. https://doi.org/10.1038/s41573-019-0012-9Wang D., Tai P.W., Gao G. Adeno-associated virus vector as a platform for gene therapy delivery. Nature Rev. Drug Discov. 2019;18(5):358–378. https://doi.org/10.1038/s41573-019-0012-9Brydon E.M., Bronstein R., Buskin A., Lako M., Pierce E.A., Fernandez-Godino R. AAV-mediated gene augmentation therapy restores critical functions in mutant PRPF31+/− iPSC-derived RPE cells. Mol. Ther. Methods Clin. Develop. 2019;15:392–402. https://doi.org/10.1016/j.omtm.2019.10.014Brydon E.M., Bronstein R., Buskin A., Lako M., Pierce E.A., Fernandez-Godino R. AAV-mediated gene augmentation therapy restores critical functions in mutant PRPF31+/− iPSC-derived RPE cells. Mol. Ther. Methods Clin. Develop. 2019;15:392–402. https://doi.org/10.1016/j.omtm.2019.10.014Xing M., Wang X., Chi Y., Zhou D. Gene therapy for colorectal cancer using adenovirus-mediated full-length antibody, cetuximab. Oncotarget. 2016;7(19):28262. https://doi.org/10.18632/oncotarget.8596Xing M., Wang X., Chi Y., Zhou D. Gene therapy for colorectal cancer using adenovirus-mediated full-length antibody, cetuximab. Oncotarget. 2016;7(19):28262. https://doi.org/10.18632/oncotarget.8596Hollidge B.S., Carroll H.B., Qian R., Fuller M.L., Giles A.R., Mercer A.C., Danos O., Liu Y., Bruder J.T., Smith J.B. Kinetics and durability of transgene expression after intrastriatal injection of AAV9 vectors. Front. Neurol. 2022;13:1051559. https://doi.org/10.3389/fneur.2022.1051559Hollidge B.S., Carroll H.B., Qian R., Fuller M.L., Giles A.R., Mercer A.C., Danos O., Liu Y., Bruder J.T., Smith J.B. Kinetics and durability of transgene expression after intrastriatal injection of AAV9 vectors. Front. Neurol. 2022;13:1051559 https://doi.org/10.3389/fneur.2022.1051559McCarty D.M. Self-complementary AAV vectors; advances and applications. Mol. Ther. 2008;16(10):1648–1656. https://doi.org/10.1038/mt.2008.171McCarty D.M. Self-complementary AAV vectors; advances and applications. Mol. Ther. 2008;16(10):1648–1656. https://doi.org/10.1038/mt.2008.171Yokoi K., Kachi S., Zhang H.S., Gregory P.D., Spratt S.K., Samulski R.J., Campochiaro P.A. Ocular gene transfer with self-complementary AAV vectors. Investigative Ophthalmology & Visual Science (IOVS). 2007;48(7):3324–3328. https://doi.org/10.1167/iovs.06-1306Yokoi K., Kachi S., Zhang H.S., Gregory P.D., Spratt S.K., Samulski R.J., Campochiaro P.A. Ocular gene transfer with self-complementary AAV vectors. Investigative Ophthalmology & Visual Science (IOVS). 2007;48(7): 3324–3328. https://doi.org/10.1167/iovs.06-1306Rincon M.Y., de Vin F., Duqué S.I., Fripont S., Castaldo S.A., Bouhuijzen-Wenger J., Holt M.G. Widespread transduction of astrocytes and neurons in the mouse central nervous system after systemic delivery of a self-complementary AAV-PHP.B vector. Gene Ther. 2018;25(2):83–92. https://doi.org/10.1038/s41434-018-0005-zRincon M.Y., de Vin F., Duqué S.I., Fripont S., Castaldo S.A., Bouhuijzen-Wenger J., Holt M.G. Widespread transduction of astrocytes and neurons in the mouse central nervous system after systemic delivery of a self-complementary AAV-PHP.B vector. Gene Ther. 2018;25(2):83–92. https://doi.org/10.1038/s41434-018-0005-zWu T., Töpfer K.., Lin S.W., Li H., Bian A., Zhou X.Y., High K.A., Ertl H.C. Self-complementary AAVs induce more potent transgene product-specific immune responses compared to a single-stranded genome. Mol. Ther. 2012;20(3):572–579. https://doi.org/10.1038/mt.2011.280Wu T., Töpfer K.., Lin SW., Li H., Bian A., Zhou X.Y., High K.A., Ertl H.C. Self-complementary AAVs induce more potent transgene product-specific immune responses compared to a single-stranded genome. Mol. Ther. 2012;20(3):572–579. https://doi.org/10.1038/mt.2011.280McCarty D.M., Monahan P.E., Samulski R.J. Selfcomplementary recombinant adeno-associated virus (scAAV) vectors promote efficient transduction independently of DNA synthesis. Gene Ther. 2001;8(16):1248–1554. https://doi.org/10.1038/sj.gt.3301514McCarty D.M., Monahan P.E., Samulski R.J. Selfcomplementary recombinant adeno-associated virus (scAAV) vectors promote efficient transduction independently of DNA synthesis. Gene Ther. 2001;8(16):1248–1554. https://doi.org/10.1038/sj.gt.3301514Katada Y., Kobayashi K., Tsubota K., Kurihara T. Evaluation of AAV-DJ vector for retinal gene therapy. Peer J. 2019;7:e6317. https://doi.org/10.7717/peerj.6317Katada Y., Kobayashi K., Tsubota K., Kurihara T. Evaluation of AAV-DJ vector for retinal gene therapy. Peer J. 2019;7:e6317. https://doi.org/10.7717/peerj.6317Полянский Д.С., Рябова Е.И., Деркаев А.А., Старков Н.С., Кашапова И.С., Щебляков Д.В., Карпов А.П., Есмагамбетов И.Б. Разработка технологии культивирования клеточной линии, продуцирующей однодоменное антитело, слитое с Fc-фрагментом IgG1 человека. Тонкие химические технологии. 2024;19(3):240–257. https://doi.org/10.32362/2410-6593-2024-19-3-240-257Polyansky D.S., Ryabova E.I., Derkaev A.A., Starkov N.S., Kashapova I.S., Shcheblyakov D.V., Karpov A.P., Esmagambetov I.B. Development of technology for culturing a cell line producing a single-domain antibody fused with the Fc fragment of human IgG1. Fine Chem. Technol. 2024;19(3): 240–257. https://doi.org/10.32362/2410-6593-2024-19-3-240-257

The authors declare that there are no conflicts of interest present.