chemicallytechFine Chemical TechnologiesТонкие химические технологии2410-65932686-7575MIREA – Russian Technological University (RTU MIREA).10.32362/2410-6593-2023-18-1-48-64chemicallytech-1932Research ArticleBIOCHEMISTRY AND BIOTECHNOLOGYБИОХИМИЯ И БИОТЕХНОЛОГИЯMethod for obtaining recombinant antibodies produced by a cell line transduced with recombinant adenovirusesСпособ получения рекомбинантных антител, продуцируемых клеточной линией, трансдуцированной рекомбинантными аденовирусамиhttps://orcid.org/0000-0001-6959-9988СедоваЕ. С.SedovaE. S.

Седова Елена Сергеевна, к.б.н., научный сотрудник лаборатории молекулярной биотехнологии

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Scopus Author ID 36341354100, ResearcherID S-4206-2017

Elena S. Sedova, Cand. Sci. (Biol.), Researcher, Laboratory of Molecular Biotechnology

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

Scopus Author ID 36341354100, ResearcherID S-4206-2017

sedova-es@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-8518-1669ЩербининД. Н.ShcherbininD. N.

Щербинин Дмитрий Николаевич, к.б.н., научный сотрудник лаборатории молекулярной биотехнологии

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Scopus Author ID 36599350900, ResearcherID E-7682-2014

Dmitriy N. Shcherbinin, Cand. Sci. (Biol.), Researcher, Laboratory of Molecular Biotechnology

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

Scopus Author ID 36599350900, ResearcherID E-7682-2014

dim284@inbox.ruhttps://orcid.org/0000-0001-8453-797XБанделюкА. С.BandelyukA. S.

Банделюк Алина Сергеевна, младший научный сотрудник лаборатории молекулярной биотехнологии

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Scopus Author ID 56290408700, ResearcherID D-9771-2014

Alina S. Bandelyuk, Junior Researcher, Laboratory of Molecular Biotechnology

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

Scopus Author ID 56290408700, ResearcherID D-9771-2014

alinabond88@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-4731-1629ВерховскаяЛ. В.VerkhovskayaL. V.

Верховская Людмила Викторовна, к.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории молекулярной биотехнологии

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Ludmila V. Verkhovskaya, Cand. Sci. (Biol.), Leading Researcher, Laboratory of Molecular Biotechnology

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

verkhov@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-6476-3520ВисковаН. Ю.ViskovaN. Yu.

Вискова Наталья Юрьевна, научный сотрудник лаборатории клеточной микробиологии

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Natalia Yu. Viskova, Researcher, Laboratory of Molecular Biotechnology

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

apr2004@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-8059-9743АвдонинаЕ. Д.AvdoninaE. D.

Авдонина Елена Дмитриевна, младший научный сотрудник лаборатории молекулярной биотехнологии

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Elena D. Avdonina, Junior Researcher, Laboratory of Molecular Biotechnology

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

avdonina.yelena@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-4130-177XПрокофьевВ. В.ProkofievV. V.

Прокофьев Владимир Владимирович, лаборант-исследователь лаборатории иммунобиотехнологии

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Scopus Author ID 57300704700

Vladimir V. Prokofiev, Laboratory Assistant-Researcher, Laboratory of Immunobiotechnology

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

Scopus Author ID 57300704700

vladimir.prokofev2609@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-2687-5185РябоваE. И.RyabovaE. I.

Рябова Екатерина Игоревна, младший научный сотрудник лаборатории иммунобиотехнологии

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Scopus Author ID 57301278100, ResearcherID AAE-7335-2022

Ekaterina I. Ryabova, Junior Researcher, Laboratory of Immunobiotechnology

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

Scopus Author ID 57301278100, ResearcherID AAE-7335-2022

ryabovaei96@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-2063-2449ЕсмагамбетовИ. Б.EsmagambetovI. B.

Есмагамбетов Ильяс Булатович, ведущий научный сотрудник лаборатории иммунобиотехнологии

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Scopus Author ID 56120429700, ResearcherID E-3327-2014

Ilias B. Esmagambetov, Cand. Sci. (Biol.), Leading Researcher, Laboratory of Immunobiotechnology

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

Scopus Author ID 56120429700, ResearcherID E-3327-2014

esmagambetov@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0003-0780-5998ПервойкинаК. А.PervoykinaK. A.

Первойкина Кристина Алексеевна, лаборант-исследователь лаборатории молекулярной биотехнологии

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Kristina A. Pervoykina, Laboratory Assistant-Researcher, Laboratory of Molecular Biotechnology

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

uk-ru123@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0001-9289-3608БогачеваЕ. А.BogachevaE. A.

Богачева Елена Александровна, младший научный сотрудник лаборатории молекулярной биотехнологии

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

boga4eva85@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-0230-1822ЛысенкоА. А.LysenkoA. A.

Лысенко Андрей Александрович, старший научный сотрудник лаборатории молекулярной биотехнологии

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18)

Scopus Author ID 55573757600,

Andrei A. Lysenko, Senior Researcher, Laboratory of Molecular Biotechnology

18 Gamaleya ul., Moscow, 123098

Scopus Author ID 55573757600

andrei.a.lysenko@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-5268-1296ШмаровМ. М.ShmarovM. M.

Шмаров Максим Михайлович, д.б.н., заведующий лаборатории молекулярной биотехнологии

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Scopus Author ID 6507322279, ResearcherID D-8662-2014

Maksim M. Shmarov, Dr. Sci. (Biol.), Head of the Laboratory of Molecular Biotechnology

18, Gamaleya ul., Moscow, 123098

Scopus Author ID 6507322279, ResearcherID D-8662-2014

ribozym@mail.ru«Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Минздрава РФРоссияN.F. Gamaleya National Research Center for Epidemiology and Microbiology (The Gamaleya National Center), Ministry of Health of the Russian FederationRussian Federation«Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Минздрава РФРоссияN.F. Gamaleya National Research Center for Epidemiology and Microbiology (The Gamaleya National Center), Ministry of Health of the Russian FederationRussian Federation«Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Минздрава РФРоссияN.F. Gamaleya National Research Center for Epidemiology and Microbiology (The Gamaleya National Center), Ministry of Health of the Russian FederationRussian Federation«Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Минздрава РФРоссияN.F. Gamaleya National Research Center for Epidemiology and Microbiology (The Gamaleya National Center), Ministry of Health of the Russian FederationRussian Federation20232003202318148–64Copyright © Sedova E.S., Shcherbinin D.N., Bandelyuk A.S., Verkhovskaya L.V., Viskova N.Y., Avdonina E.D., Prokofiev V.V., Ryabova E.I., Esmagambetov I.B., Pervoykina K.A., Bogacheva E.A., Lysenko A.A., Shmarov M.M., 20232023Седова Е.С., Щербинин Д.Н., Банделюк А.С., Верховская Л.В., Вискова Н.Ю., Авдонина Е.Д., Прокофьев В.В., Рябова E.И., Есмагамбетов И.Б., Первойкина К.А., Богачева Е.А., Лысенко А.А., Шмаров М.М.Sedova E.S., Shcherbinin D.N., Bandelyuk A.S., Verkhovskaya L.V., Viskova N.Y., Avdonina E.D., Prokofiev V.V., Ryabova E.I., Esmagambetov I.B., Pervoykina K.A., Bogacheva E.A., Lysenko A.A., Shmarov M.M.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.finechem-mirea.ru/jour/article/view/1932

Objectives. To develop a technology for obtaining recombinant antibodies in a suspension culture of human HEK293 cells using transduction with recombinant adenovirus serotype 5 (rAd5) carrying genes expressing heavy and light chains of antibodies on the example of two broadspectrum anti-influenza antibodies 27F3 and CR9114.Methods. Ad5-27F3-H, Ad5-CR9114-H, and Ad5-27F3-L recombinant adenoviruses carrying the 27F3 antibody heavy chain gene, CR9114 antibody heavy chain gene, and 27F3 light chain gene, respectively, were generated using the AdEasy™ Adenoviral vector system. To accumulate preparative amounts of recombinant r27F3 and rCR9114 antibodies, the HEK293 suspension cell line was transduced with recombinant adenoviruses carrying genes for heavy and light chains of antibodies. The cells were cultured in a wave-type bioreactor. Chromatography was used to purify recombinant antibodies from the culture medium. After analyzing the molecular weights of purified antibodies using protein electrophoresis, their ability to interact with influenza A and B viruses was analyzed using the Western blot technique, while their ability to neutralize influenza A and B viruses was evaluated using the virus neutralization assay.Results. A method for the accumulation and purification of recombinant r27F3 and CR9114 antibodies from the culture medium of a suspension culture of human cells following transduction with its recombinant adenoviruses carrying the genes for heavy and light chains of these antibodies was developed. The ability of the r27F3 antibody to interact with and neutralize influenza A viruses of group 1 (except influenza A virus subtype H2) and group 2 was shown. The ability of the rCR9114 antibody to interact with influenza A viruses of group 1 and influenza B viruses, as well as to neutralize influenza A viruses of group 1, was demonstrated.Conclusions. A technology for obtaining recombinant antibodies in a suspension culture of HEK293 cells using transduction with recombinant adenoviruses carrying genes expressing heavy and light chains of antibodies was developed along with a confirmation of their specificity.

Цели. Разработать технологию получения рекомбинантных антител в суспензионной культуре клеток человека HEK293 с помощью трансдукции рекомбинантными аденовирусами человека пятого серотипа, несущими гены, экспрессирующие тяжелые и легкие цепи антител, на примере двух противогриппозных антител широкого спектра действия 27F3 и CR9114.Методы. Рекомбинантные аденовирусы Ad5-27F3-H, Ad5-CR9114-H и Ad5-27F3-L, несущие ген тяжелой цепи антитела 27F3, ген тяжелой цепи антитела CR9114 и ген легкой цепи 27F3, были получены с помощью набора AdEasy™ Adenoviral vector system. Для накопления препаративных количеств рекомбинантных антител r27F3 и rCR9114 суспензионную клеточную линию HEK293 трансдуцировали рекомбинантными аденовирусами, несущими гены тяжелых и легких цепей антител, и культивировали клетки в биореакторе волнового типа. Рекомбинантные антитела очищали из культуральной жидкости хроматографическим методом. Молекулярную массу полученных антител анализировали с помощью белкового электрофореза, их способность взаимодействовать с вирусами гриппа А и В методом вестерн-блот анализа, а способность нейтрализовать вирусы гриппа А и В с помощью реакции вирус-нейтрализации.Результаты. Отработана методика накопления и очистки рекомбинантных антител r27F3 и CR9114 из культуральной жидкости суспензионной культуры клеток человека после трансдукции ее рекомбинантными аденовирусами, несущими гены тяжелых и легких цепей этих антител. Показана способность антитела r27F3 взаимодействовать с вирусами гриппа А подгруппы 1 (кроме вируса грипп А субтипа H2) и подгруппы 2 и нейтрализовать их. Показана способность антитела rCR9114 взаимодействовать с вирусами гриппа А подгруппы 1 и вирусами гриппа В, а также нейтрализовать вирусы гриппа А подгруппы 1.Выводы. Отработана технология получения рекомбинантных антител в суспензионной культуре клеток HEK293 с помощью трансдукции рекомбинантными аденовирусами, несущими гены, экспрессирующие тяжелые и легкие цепи антител, и показана их специфичность.

рекомбинантные антителарекомбинантный аденовирус человека пятого серотипасуспензионная культура клетокrecombinant antibodiesrecombinant human adenovirus 5 serotypesuspension cell cultureReferencesKaplon H., Chenoweth A., Crescioli S., Reichert J.M. Antibodies to watch in 2022. MAbs. 2022 Jan-Dec. 2022;14(1):2014296. https://doi.org/10.1080/19420862.2021.2014296Kaplon H., Chenoweth A., Crescioli S., Reichert J.M. Antibodies to watch in 2022. MAbs. 2022 Jan-Dec. 2022;14(1):2014296. https://doi.org/10.1080/19420862.2021.2014296Kumar R., Parray H.A., Shrivastava T., Sinha S., Luthra K. Phage display antibody libraries: A robust approach for generation of recombinant human monoclonal antibodies. Int. J. Biol. Macromol. 2019;135:907–918. https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2019.06.006Kumar R., Parray H.A., Shrivastava T., Sinha S., Luthra K Phage display antibody libraries: A robust approach for generation of recombinant human monoclonal antibodies. Int. J. Biol. Macromol. 2019;135:907–918. https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2019.06.006Альтшулер Е.П., Серебряная Д.В., Катруха А.Г. Получение рекомбинантных антител и способы увеличения их аффинности. Успехи биологической химии. 2010;50:203–258. URL: https://www.fbras.ru/wp-content/uploads/2017/10/Altschuler.pdfAl’tshuler E.P., Serebryanaya D.V., Katrukha A.G. Obtaining recombinant antibodies and methods for increasing their affinity. Uspekhi Biologicheskoi Khimii. 2010;50:203–258 (in Russ.). URL: https://www.fbras.ru/wp-content/uploads/2017/10/Altschuler.pdfYu J., Guo Y., Gu Y., Fan X., Li F., Song H., Nian R., Liu W. A novel silk fibroin protein-based fusion system for enhancing the expression of nanobodies in Escherichia coli. Appl. Microbiol. Biotechnol. 2022;106(5–6):1967–1977. https://doi.org/10.1007/s00253-022-11857-7Yu J., Guo Y., Gu Y., Fan X., Li F., Song H., Nian R., Liu W. A novel silk fibroin protein-based fusion system for enhancing the expression of nanobodies in Escherichia coli. Appl. Microbiol. Biotechnol. 2022;106(5–6):1967–1977. https://doi.org/10.1007/s00253-022-11857-7Garvey M. Non-mammalian eukaryotic expression systems yeast and fungi in the production of biologics. J. Fungi (Basel). 2022;8(11):1179. https://doi.org/10.3390/jof8111179Garvey M. Non-mammalian eukaryotic expression systems yeast and fungi in the production of biologics. J. Fungi (Basel). 2022;8(11):1179. https://doi.org/10.3390/jof8111179Vazquez-Lombardi R., Nevoltris D., Luthra A., Schofield P., Zimmermann C., Christ D. Transient expression of human antibodies in mammalian cells. Nat. Protoc. 2019;13:99–117. https://doi.org/10.1038/nprot.2017.126Vazquez-Lombardi R., Nevoltris D., Luthra A., Schofield P., Zimmermann C., Christ D. Transient expression of human antibodies in mammalian cells. Nat. Protoc. 2019;13:99–117. https://doi.org/10.1038/nprot.2017.126Korn J., Schäckermann D., Kirmann T., Bertoglio F., Steinke S., Heisig J., Ruschig M., Rojas G., Langreder N., Wenzel E.V., Roth K.D.R., Becker M., Meier D., van den Heuvel J., Hust M., Dübel S., Schubert M. Baculovirus-free insect cell expression system for high yield antibody and antigen production. Sci Rep. 2020;10(1):21393. https://doi.org/10.1038/s41598-020-78425-9Korn J., Schäckermann D., Kirmann T., Bertoglio F., Steinke S., Heisig J., Ruschig M., Rojas G., Langreder N., Wenzel E.V., Roth K.D.R., Becker M., Meier D., van den Heuvel J., Hust M., Dübel S., Schubert M. Baculovirus-free insect cell expression system for high yield antibody and antigen production. Sci Rep. 2020;10(1):21393. https://doi.org/10.1038/s41598-020-78425-9Huang Y.M., Hu W., Rustandi E., Chang K., Yusuf-Makagiansar H., Ryll T. Maximizing productivity of CHO cell-based fed-batch culture using chemically defined media conditions and typical manufacturing equipment. Biotechnol. Prog. 2010;26(5):1400–1410. https://doi.org/10.1002/btpr.436Huang Y.M., Hu W., Rustandi E., Chang K., Yusuf-Makagiansar H., Ryll T. Maximizing productivity of CHO cell-based fed-batch culture using chemically defined media conditions and typical manufacturing equipment. Biotechnol. Prog. 2010;26(5):1400–1410. https://doi.org/10.1002/btpr.436Gupta K., Parasnis M., Jain R., Dandekar P. Vectorrelated stratagems for enhanced monoclonal antibody production in mammalian cells. Biotechnol. Adv. 2019;37(8):107415. https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2019.107415Gupta K., Parasnis M., Jain R., Dandekar P. Vectorrelated stratagems for enhanced monoclonal antibody production in mammalian cells. Biotechnol. Adv. 2019;37(8):107415. https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2019.107415Jäger V., Büssow K., Wagner A., Weber S., Hust M., Frenzel A., Schirrmann T. High level transient production of recombinant antibodies and antibody fusion proteins in HEK293 cells. BMC Biotechnol. 2013;13:52. https://doi.org/10.1186/1472-6750-13-52Jäger V., Büssow K., Wagner A., Weber S., Hust M., Frenzel A., Schirrmann T. High level transient production of recombinant antibodies and antibody fusion proteins in HEK293 cells. BMC Biotechnol. 2013;13:52. https://doi.org/10.1186/1472-6750-13-52Kim T.K., Eberwine J.H. Mammalian cell transfection: the present and the future. Anal. Bioanal. Chem. 2010;397(8):3173–3178. https://doi.org/10.1007/s00216-010-3821-6Kim T.K., Eberwine J.H. Mammalian cell transfection: the present and the future. Anal. Bioanal. Chem. 2010;397(8):3173–3178. https://doi.org/10.1007/s00216-010-3821-6Croset A., Delafosse L., Gaudry J.P., Arod C., Glez L., Losberger C., Begue D., Krstanovic A., Robert F., Vilbois F., Chevalet L., Antonsson B. Differences in the glycosylation of recombinant proteins expressed in HEK and CHO cells. J. Biotechnol. 2012;161(3):336–348. https://doi.org/10.1016/j.jbiotec.2012.06.038Croset A., Delafosse L., Gaudry J.P., Arod C., Glez L., Losberger C., Begue D., Krstanovic A., Robert F., Vilbois F., Chevalet L., Antonsson B. Differences in the glycosylation of recombinant proteins expressed in HEK and CHO cells. J. Biotechnol. 2012;161(3):336–348. https:// doi.org/10.1016/j.jbiotec.2012.06.038Tan E., Chin C.S.H., Lim Z.F.S., Ng S.K. HEK293 Cell Line as a Platform to Produce Recombinant Proteins and Viral Vectors. Front. Bioeng. Biotechnol. 2021;9:796991. https://doi.org/10.3389/fbioe.2021.796991Tan E., Chin C.S.H., Lim Z.F.S., Ng S.K. HEK293 Cell Line as a Platform to Produce Recombinant Proteins and Viral Vectors. Front. Bioeng. Biotechnol. 2021;9:796991. https://doi.org/10.3389/fbioe.2021.796991König J., Hust M., van den Heuvel J. Validation of the Production of Antibodies in Different Formats in the HEK293 Transient Gene Expression System. Methods Mol. Biol. 2021;2247:59–76. https://doi.org/10.1007/978-1-0716-1126-5_4König J., Hust M., van den Heuvel J. Validation of the Production of Antibodies in Different Formats in the HEK293 Transient Gene Expression System. Methods Mol. Biol. 2021;2247:59–76. https://doi.org/10.1007/978-1-0716-1126-5_4Рябова Е.И., Деркаев А.А., Есмагамбетов И.Б., Щебляков Д.В., Довгий М.А., Бырихина Д.В., Прокофьев В.В., Чемоданова И.П. Сравнение различных технологий получения рекомбинантного аденоассоциированного вируса в лабораторном масштабе. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2021;21(4):266–278. https://doi.org/10.30895/2221-996X-2021-21-4-266-278Ryabova E.I., Derkaev A.A., Esmagambetov I.B., Shcheblyakov D.V., Dovgii M.A., Byrikhina D.V., Prokof’ev V.V., Chemodanova I.P. Comparison of different technologies for producing recombinant adeno-associated virus on a laboratory scale. BIOpreparaty. Profilaktika, diagnostika, lechenie = BIOpreparations. Prevention, Diagnosis, Treatment. 2021;21(4):266–278 (in Russ.). https://doi.org/10.30895/2221-996X-2021-21-4-266-278Greber U.F., Gomez-Gonzalez A. Adenovirus – a blueprint for gene delivery. Curr. Opin. Virol. 2021;48:49–56. https://doi.org/10.1016/j.coviro.2021.03.006Greber U.F., Gomez-Gonzalez A. Adenovirus – a blueprint for gene delivery. Curr. Opin. Virol. 2021;48:49–56. https://doi.org/10.1016/j.coviro.2021.03.006Lang S., Xie J., Zhu X., Wu N.C., Lerner R.A., Wilson I.A. Antibody 27F3 broadly targets influenza A group 1 and 2 hemagglutinins through a further variation in VH1-69 antibody orientation on the HA stem. Cell Rep. 2017;20(12):2935–2943. https://doi.org/10.1016/j.celrep.2017.08.084Lang S., Xie J., Zhu X., Wu N.C., Lerner R.A., Wilson I.A. Antibody 27F3 broadly targets influenza A group 1 and 2 hemagglutinins through a further variation in VH1-69 antibody orientation on the HA stem. Cell Rep. 2017;20(12):2935–2943. https://doi.org/10.1016/j.celrep.2017.08.084Dreyfus C., Laursen N.S., Kwaks T., Zuijdgeest D., Khayat R., Ekiert D.C., Lee J.H., Metlagel Z., Bujny M.V., Jongeneelen M., van der Vlugt R., Lamrani M., Korse H.J., Geelen E., Sahin Ö., Sieuwerts M., Brakenhoff J.P., Vogels R., Li O.T., Poon L.L., Peiris M., Koudstaal W., Ward A.B., Wilson I.A., Goudsmit J., Friesen R.H. Highly conserved protective epitopes on influenza B viruses. Science. 2012;337(6100):1343–1348. https://doi.org/10.1126/science.1222908Dreyfus C., Laursen N.S., Kwaks T., Zuijdgeest D., Khayat R., Ekiert D.C., Lee J.H., Metlagel Z., Bujny M.V., Jongeneelen M., van der Vlugt R., Lamrani M., Korse H.J., Geelen E., Sahin Ö., Sieuwerts M., Brakenhoff J.P., Vogels R., Li O.T., Poon L.L., Peiris M., Koudstaal W., Ward A.B., Wilson I.A., Goudsmit J., Friesen R.H. Highly conserved protective epitopes on influenza B viruses. Science. 2012;337(6100):1343–1348. https://doi.org/10.1126/science.1222908Tutykhina I., Esmagambetov I., Bagaev A., Pichugin A., Lysenko A., Shcherbinin D., Sedova E., Logunov D., Shmarov M., Ataullakhanov R., Naroditsky B., Gintsburg A. Vaccination potential of B and T epitope-enriched NP and M2 against Influenza A viruses from different clades and hosts. PLoS One. 2018;13(1):e0191574. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0191574Tutykhina I., Esmagambetov I., Bagaev A., Pichugin A., Lysenko A., Shcherbinin D., Sedova E., Logunov D., Shmarov M., Ataullakhanov R., Naroditsky B., Gintsburg A. Vaccination potential of B and T epitope-enriched NP and M2 against Influenza A viruses from different clades and hosts. PLoS One. 2018;13(1):e0191574. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0191574Шубладзе А.К., Гайдамович С.Я. Краткий курс практической вирусологии. М.: Медгиз; 1954. 272 с.Shubladze A.K., Gaidamovich S.Ya. Kratkii kurs prakticheskoi virusologii (Short Course of Practical Virology). Мoscow: Medgiz; 1954. 273 p. (in Russ.).Грибова И.Ю., Тиллиб С.В., Тутыхина И.Л., Шмаров М.М., Логунов Д.Ю., Верховска Л.В., Народицкий Б.С., Гинцбург А.Л. Эффективная экспрессия наноантител рекомбинантным аденовирусным вектором in vitro. Acta Naturae. 2011;3(3):66–72.Gribova I.Yu., Tillib S.V., Tutykhina I.L., Shmarov M.M., Logunov D.Yu., Verkhovska L.V., Naroditskii B.S., Gintsburg A.L. Effective Genetic Expression of Nanoantibodies by Recombinant Adenoviral Vector in vitro. Acta Naturae. 2011;3(3):64–70.Tutykhina I.L., Sedova E.S., Gribova I.Y., Ivanova T.I., Vasilev L.A., Rutovskaya M.V., Lysenko A.A., Shmarov M.M., Logunov D.Y., Naroditsky B.S., Tillib S.V., Gintsburg A.L. Passive immunization with a recombinant adenovirus expressing an HA (H5)-specific single-domain antibody protects mice from lethal influenza infection. Antiviral. Res. 2013;97(3):318–328. https://doi.org/10.1016/j.antiviral.2012.12.021Tutykhina I.L., Sedova E.S., Gribova I.Y., Ivanova T.I., Vasilev L.A., Rutovskaya M.V., Lysenko A.A., Shmarov M.M., Logunov D.Y., Naroditsky B.S., Tillib S.V., Gintsburg A.L. Passive immunization with a recombinant adenovirus expressing an HA (H5)-specific single-domain antibody protects mice from lethal influenza infection. Antiviral. Res. 2013;97(3):318–328. https://doi.org/10.1016/j.antiviral.2012.12.021Щербинин Д.Н., Алексеева С.В., Шмаров М.М., Смирнов Ю.А., Народицкий Б.С., Гинцбург А.Л. Анализ В-клеточных эпитопов гемагглютинина вирусов гриппа. Acta Naturae. 2016;8(1):13–20. https://doi.org/10.32607/20758251-2016-8-1-13-20Shcherbinin D.N., Alekseeva S.V., Shmarov M.M., Smirnov Yu.A., Naroditskii B.S., Gintsburg A.L. The Analysis of B-Cell Epitopes of Influenza Virus Hemagglutinin. Acta Naturae. 2016;8(1):13–20. https://doi.org/10.32607/20758251-2016-8-1-13-20Есмагамбетов И.Б., Щебляков Д.В., Егорова Д.А., Воронина О.Л., Деркаев А.А., Воронина Д.В., Попова О., Рябова Е.И., Щербинин Д.Н., Аксенова Е.И., Семенов А.Н., Кунда М.С., Рыжова Н.Н., Зубкова О.В., Тухватулин А.И., Логунов Д.Ю., Народицкий Б.С., Борисевич С.В., Гинцбург А.Л. Наноантитела – потенциальный терапевтический препарат против лихорадки Эбола. Acta Naturae. 2021;13(4):53–63. https://doi.org/10.32607/actanaturae.11487Esmagambetov I.B., Shcheblyakov D.V., Egorova D.A., et al. Nanobodies Are Potential Therapeutic Agents for the Ebola Virus Infection. Acta Naturae. 2021;13(4):53–63. https://doi.org/10.32607/actanaturae.11487Throsby M., van den Brink E., Jongeneelen M., Poon L.L., Alard P., Cornelissen L., Bakker A., Cox F., van Deventer E., Guan Y., Cinatl J., ter Meulen J., Lasters I., Carsetti R., Peiris M., de Kruif J., Goudsmit J. Heterosubtypic neutralizing monoclonal antibodies cross-protective against H5N1 and H1N1 recovered from human IgM+ memory B cells. PloS One. 2008;3(12):e3942. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0003942Throsby M., van den Brink E., Jongeneelen M., Poon L.L., Alard P., Cornelissen L., Bakker A., Cox F., van Deventer E., Guan Y., Cinatl J., ter Meulen J., Lasters I., Carsetti R., Peiris M., de Kruif J., Goudsmit J. Heterosubtypic neutralizing monoclonal antibodies cross-protective against H5N1 and H1N1 recovered from human IgM+ memory B cells. PloS One. 2008;3(12):e3942. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0003942

The authors declare that there are no conflicts of interest present.